Profilarea ADN - DNA profiling

Profilarea ADN (numită și amprentarea ADN-ului ) este procesul de determinare a caracteristicilor ADN ale unui individ . Analiza ADN destinată identificării unei specii, mai degrabă decât a unui individ, se numește cod de bare ADN .

Profilarea ADN este o tehnică criminalistică în investigațiile penale , comparând profilurile suspecților criminali cu probele ADN, astfel încât să se evalueze probabilitatea implicării lor în infracțiune. Este, de asemenea, utilizat în testarea filiației , pentru a stabili eligibilitatea imigrației și în cercetarea genealogică și medicală. Profilarea ADN a fost, de asemenea, utilizată în studiul populațiilor de animale și plante din domeniile zoologiei, botanicii și agriculturii.

fundal

Începând cu anii 1980, progresele științifice au permis utilizarea ADN-ului ca material pentru identificarea unui individ. Primul brevet care acoperă utilizarea directă a variației ADN pentru criminalistică a fost depus de Jeffrey Glassberg în 1983, pe baza lucrărilor pe care le făcuse în timpul Universității Rockefeller în 1981. În Regatul Unit , geneticianul Sir Alec Jeffreys a dezvoltat independent un proces de profilare a ADN-ului începând din sfârșitul anului 1984 în timp ce lucra la Departamentul de genetică la Universitatea din Leicester .

Procesul, dezvoltat de Jeffreys în colaborare cu Peter Gill și Dave Werrett de la Forensic Science Service (FSS), a fost folosit pentru prima dată criminalistic în soluționarea crimei a două adolescente care fuseseră violate și ucise în Narborough, Leicestershire în 1983 și 1986. În ancheta pentru crimă, condusă de detectivul David Baker , ADN-ul conținut în probele de sânge obținute voluntar de la aproximativ 5.000 de bărbați locali care au asistat de bunăvoie Constituția Leicestershire cu ancheta, a condus la exonerarea unui bărbat care a mărturisit una dintre infracțiuni și condamnarea ulterioară a lui Colin Pitchfork . Pitchfork, un angajat local de panificație, la forțat pe colegul său de serviciu Ian Kelly să-l înlocuiască atunci când i-a furnizat o probă de sânge; Kelly a folosit apoi un pașaport fals pentru a-l imita pe Pitchfork. Un alt coleg a raportat înșelăciunea la poliție. Pitchfork a fost arestat, iar sângele său a fost trimis la laboratorul lui Jeffrey pentru procesare și dezvoltare profil. Profilul lui Pitchfork s-a potrivit cu cel al ADN-ului lăsat de criminal, ceea ce a confirmat prezența lui Pitchfork la ambele scene ale crimei; a pledat vinovat de ambele crime.

Deși 99,9% din secvențele de ADN uman sunt aceleași la fiecare persoană, suficient ADN este diferit încât este posibil să se distingă un individ de altul, cu excepția cazului în care sunt gemeni monozigoți (identici) . Profilarea ADN utilizează secvențe repetitive care sunt foarte variabile, numite repetări în tandem cu număr variabil (VNTR), în special repetări în tandem scurt (STR), cunoscute și sub numele de microsateliți și minisateliți . VNTR loci sunt similare între indivizi strâns legate, dar sunt atât de variabile ca persoanele care nu au legătură este puțin probabil să aibă aceleași VNTRs.

Procese de profilare

Variații ale lungimii alelei VNTR la 6 indivizi.

Alec Jeffreys , un pionier al profilării ADN-ului.

Procesul, dezvoltat de Glassberg și independent de Jeffreys , începe cu un eșantion de ADN al unui individ (numit de obicei „eșantion de referință”). Probele de referință sunt de obicei colectate printr-un tampon bucal . Când acest lucru nu este disponibil (de exemplu, când este necesară o decizie judecătorească, dar nu se poate obține), pot fi necesare alte metode pentru a colecta o probă de sânge , salivă , material seminal , lubrifiere vaginală sau alte lichide sau țesuturi din articole de uz personal (de exemplu, un periuță de dinți, aparat de ras) sau din probe depozitate (de exemplu, spermă înmulțită sau țesut de biopsie ). Probele obținute de la rude de sânge pot indica profilul unui individ, la fel ca și rămășițele umane profilate anterior. O probă de referință este apoi analizată pentru a crea profilul ADN al individului folosind una dintre tehnicile discutate mai jos. Profilul ADN este apoi comparat cu un alt eșantion pentru a determina dacă există o potrivire genetică.

Extracția ADN-ului

Când se obține o probă precum sânge sau salivă, ADN-ul este doar o mică parte din ceea ce este prezent în probă. Înainte ca ADN-ul să poată fi analizat, acesta trebuie extras din celule și purificat. Există multe modalități prin care se poate realiza acest lucru, dar toate metodele urmează aceeași procedură de bază. Celulele și membranele nucleare trebuie rupte pentru a permite ADN-ului să fie liber în soluție. Odată ce ADN-ul este liber, acesta poate fi separat de toate celelalte componente celulare. După ce ADN-ul a fost separat în soluție, resturile celulare rămase pot fi apoi îndepărtate din soluție și aruncate, lăsând doar ADN. Cele mai comune metode de extracție a ADN includ extracția organică (numită și extracția cu fenol cloroform), extracția Chelex și extracția în fază solidă . Extracția diferențială este o versiune modificată a extracției în care ADN-ul din două tipuri diferite de celule poate fi separat unul de celălalt înainte de a fi purificat din soluție. Fiecare metodă de extracție funcționează bine în laborator, dar analiștii își selectează de obicei metoda preferată pe baza unor factori precum costul, timpul implicat, cantitatea de ADN obținută și calitatea ADN-ului obținut. După ce ADN-ul este extras din probă, acesta poate fi analizat, fie prin analiza RFLP sau cuantificare și analiză PCR.

Analiza RFLP

Restricție Fragment Lungime Polimorfism

Primele metode de aflare a geneticii utilizate pentru profilarea ADN-ului au implicat analiza RFLP . ADN-ul este colectat din celule și tăiat în bucăți mici folosind o enzimă de restricție (un digest de restricție). Acest lucru generează fragmente de ADN de dimensiuni diferite ca o consecință a variațiilor dintre secvențele de ADN ale diferiților indivizi. Fragmentele sunt apoi separate pe baza mărimii folosind electroforeza pe gel . Fragmentele separate sunt apoi transferate pe un filtru de nitroceluloză sau nailon; această procedură se numește Southern blot . Fragmentele de ADN din blot sunt fixate permanent de filtru, iar firele de ADN sunt denaturate . Se adaugă apoi molecule de sondă radiomarcate care sunt complementare secvențelor din genom care conțin secvențe repetate. Aceste secvențe de repetare tind să varieze în lungime între diferiți indivizi și sunt numite secvențe de repetare în număr variabil în tandem sau VNTR. Moleculele sondei se hibridizează cu fragmente de ADN care conțin secvențe repetate, iar moleculele sondei în exces sunt spălate. Pata este apoi expusă la un film cu raze X. Fragmente de ADN care s-au legat de moleculele sondei apar ca benzi fluorescente pe film.

Tehnica Southern blot necesită cantități mari de ADN eșantion nedegradat. De asemenea, tehnica RFLP multilocus originală a lui Alec Jeffrey a analizat multe loci minisatelite în același timp, crescând variabilitatea observată, dar făcând dificilă discernerea alelelor individuale (și, prin urmare, excluderea testării paternității ). Aceste tehnici timpurii au fost înlocuite de teste bazate pe PCR .

Analiza reacției în lanț a polimerazei (PCR)

Dezvoltat de Kary Mullis în 1983, a fost raportat un proces prin care porțiuni specifice din ADN-ul probei pot fi amplificate aproape la infinit (Saiki și colab. 1985, 1985). Procesul, reacția în lanț a polimerazei (PCR), imită procesul biologic de replicare a ADN-ului , dar îl limitează la secvențe specifice de ADN de interes. Odată cu invenția tehnicii PCR, profilarea ADN a făcut pași uriași înainte atât în ceea ce privește puterea discriminatorie, cât și capacitatea de a recupera informații din probe inițiale foarte mici (sau degradate).

PCR amplifică foarte mult cantitățile unei anumite regiuni de ADN. În procesul PCR, proba de ADN este denaturată în fire separate de polinucleotide individuale prin încălzire. Două primeri de ADN oligonucleotidici sunt folosiți pentru a hibridiza cu două situri apropiate corespunzătoare pe catene de ADN opuse, astfel încât extensia enzimatică normală a terminalului activ al fiecărui primer (adică capătul 3 ' ) conduce spre celălalt primer. PCR utilizează enzime de replicare care sunt tolerante la temperaturi ridicate, cum ar fi polimeraza termostabilă Taq . În acest mod, sunt generate două noi copii ale secvenței de interes. Denaturarea, hibridizarea și extinderea repetate în acest mod produc un număr în creștere exponențial de copii ale ADN-ului de interes. Instrumentele care efectuează cicluri termice sunt ușor disponibile din surse comerciale. Acest proces poate produce o amplificare de milioane ori mai mare a regiunii dorite în 2 ore sau mai puțin.

Timpurii testele , cum ar fi HLA - DQ alfa revers dot blot de benzi a crescut pentru a fi foarte popular pentru a debitului ; ușurința lor de utilizare, iar viteza cu care ar putea fi obținut un rezultat. Cu toate acestea, acestea nu au fost la fel de discriminante ca analiza RFLP. De asemenea, a fost dificil să se determine un profil ADN pentru probe mixte, cum ar fi un tampon vaginal de la o victimă de agresiune sexuală .

Cu toate acestea, metoda PCR a fost ușor de adaptat pentru analiza VNTR , în special a locurilor STR . În ultimii ani, cercetările în cuantificarea ADN-ului uman s-au concentrat pe noi tehnici PCR cantitative (în timp real) (qPCR). Metodele PCR cantitative permit măsurători automate, precise și cu randament ridicat. Studiile interlaboratoare au demonstrat importanța cuantificării ADN-ului uman asupra realizării unei interpretări fiabile a tipării STR și a obținerii de rezultate consistente în toate laboratoarele.

Analiza STR

Sistemul de profilare a ADN-ului utilizat astăzi se bazează pe reacția în lanț a polimerazei (PCR) și folosește secvențe simple sau repetări scurte în tandem (STR). Această metodă utilizează regiuni extrem de polimorfe care au secvențe scurte repetate de ADN (cea mai comună este 4 baze repetate, dar există alte lungimi în utilizare, inclusiv 3 și 5 baze). Deoarece persoanele fără legătură au aproape sigur un număr diferit de unități repetate, STR-urile pot fi folosite pentru a discrimina între indivizi fără legătură. Acești loci STR (locații pe un cromozom ) sunt vizați cu primeri specifici secvenței și amplificați utilizând PCR. Fragmentele de ADN care rezultă sunt apoi separate și detectate cu ajutorul electroforezei . Există două metode comune de separare și detectare, electroforeza capilară (CE) și electroforeza pe gel.

Fiecare STR este polimorf, dar numărul de alele este foarte mic. De obicei, fiecare alelă STR va fi împărtășită de aproximativ 5-20% dintre indivizi. Puterea analizei STR derivă din inspectarea simultană a mai multor locuri STR. Modelul alelelor poate identifica o persoană destul de precis. Astfel, analiza STR oferă un instrument excelent de identificare. Cu cât sunt mai multe regiuni STR care sunt testate la un individ, cu atât testul devine mai discriminator.

De la țară la țară, sunt utilizate diferite sisteme de profilare a ADN bazate pe STR. În America de Nord, sistemele care amplifică loci de bază CODIS 20 sunt aproape universale, în timp ce în Regatul Unit se utilizează sistemul loci DNA-17 (care este compatibil cu baza de date națională ADN ), iar Australia folosește 18 markeri de bază. Indiferent de sistemul utilizat, multe dintre regiunile STR utilizate sunt aceleași. Aceste sisteme de profilare a ADN-ului se bazează pe reacții multiplex , prin care multe regiuni STR vor fi testate în același timp.

Adevărata putere a analizei STR se află în puterea sa statistică de discriminare. Deoarece cele 20 de loci utilizate în prezent pentru discriminare în CODIS sunt asortate independent (având un anumit număr de repetări la un locus nu se modifică probabilitatea de a avea un număr de repetări la orice alt locus), se poate aplica regula produsului pentru probabilități. . Aceasta înseamnă că, dacă cineva are tipul ADN de ABC, unde cei trei loci erau independenți, atunci probabilitatea ca acel individ să aibă acel tip de ADN este probabilitatea de a avea tipul A de probabilitatea de a avea tipul B de probabilitatea de a avea tipul C. Acest lucru a dus la capacitatea de a genera probabilități de potrivire de 1 într-un quintilion (1x10 ¹⁸ ) sau mai mult. Cu toate acestea, căutările în baza de date ADN au arătat mult mai frecvente decât se așteptau potriviri false ale profilului ADN. Mai mult, deoarece există aproximativ 12 milioane de gemeni monozigoți pe Pământ, probabilitatea teoretică nu este exactă.

În practică, riscul de potrivire contaminată este mult mai mare decât potrivirea unei rude îndepărtate, cum ar fi contaminarea unei probe din obiecte din apropiere sau din celule rămase transferate dintr-un test anterior. Riscul este mai mare pentru potrivirea celei mai frecvente persoane din eșantioane: tot ceea ce este colectat de la sau în contact cu o victimă este o sursă majoră de contaminare pentru orice alte probe aduse într-un laborator. Din acest motiv, mai multe eșantioane de control sunt de obicei testate pentru a se asigura că au rămas curate, atunci când sunt preparate în aceeași perioadă ca probele de testare efective. Potrivirile (sau variațiile) neașteptate în mai multe probe de control indică o probabilitate mare de contaminare pentru probele de testare reale. Într-un test de relație, profilurile complete de ADN ar trebui să difere (cu excepția gemenilor), pentru a demonstra că o persoană nu a fost de fapt potrivită ca fiind înrudită cu ADN-ul propriu într-o altă probă.

AFLP

O altă tehnică, AFLP, sau polimorfism de lungime de fragment amplificat a fost, de asemenea, pusă în practică la începutul anilor 1990. Această tehnică a fost, de asemenea, mai rapidă decât analiza RFLP și a folosit PCR pentru a amplifica probele de ADN. S-a bazat pe polimorfisme de repetare în tandem cu număr variabil (VNTR) pentru a distinge diverse alele, care au fost separate pe un gel de poliacrilamidă folosind o scară alelică (spre deosebire de o scară cu greutate moleculară). Benzile ar putea fi vizualizate prin colorarea cu argint a gelului. Un accent popular pentru amprentarea digitală a fost locusul D1S80. Ca și în cazul tuturor metodelor bazate pe PCR, ADN-ul foarte degradat sau cantități foarte mici de ADN pot provoca abandonul alelic (provocând o greșeală în a crede că un heterozigot este un homozigot) sau alte efecte stocastice. În plus, deoarece analiza se face pe un gel, un număr foarte mare de repetări se pot aduna în partea de sus a gelului, ceea ce face dificilă rezolvarea. Analiza AmpFLP poate fi extrem de automatizată și permite crearea ușoară a copacilor filogenetici pe baza comparării probelor individuale de ADN. Datorită costului relativ scăzut și ușurinței de instalare și operare, AmpFLP rămâne popular în țările cu venituri mai mici.

Analiza relațiilor familiale ADN

1: Se prelevează o probă de celule - de obicei un tampon obraz sau un test de sânge 2: ADN-ul este extras din proba 3: Clivarea ADN-ului prin enzima de restricție - ADN-ul este rupt în fragmente mici 4: Fragmentele mici sunt amplificate de reacția în lanț a polimerazei - rezultă multe alte fragmente 5: fragmentele de ADN sunt separate prin electroforeză 6: Fragmentele sunt transferate pe o placă de agar 7: Pe placa de agar fragmente de ADN specifice sunt legate de o sondă de ADN radioactiv 8: Placa de agar este spălată fără sondă în exces 9: Se folosește un film cu raze X pentru a detecta un model radioactiv 10: ADN-ul este comparat cu alte probe de ADN

Folosind tehnologia PCR , analiza ADN este aplicată pe scară largă pentru a determina relațiile genetice de familie, cum ar fi paternitatea, maternitatea, frăția și alte rudenii .

În timpul concepției, celula spermatică a tatălui și celula ovulului mamei, fiecare conținând jumătate din cantitatea de ADN găsită în alte celule ale corpului, se întâlnesc și se contopesc pentru a forma un ovul fertilizat, numit zigot . Zigotul conține un set complet de molecule de ADN, o combinație unică de ADN de la ambii părinți. Acest zigot se împarte și se înmulțește într-un embrion și mai târziu, o ființă umană completă.

În fiecare etapă a dezvoltării, toate celulele care formează corpul conțin același ADN - jumătate de la tată și jumătate de la mamă. Acest fapt permite testării relației să utilizeze toate tipurile de probe, inclusiv celulele libere de pe obraji colectate folosind tampoane bucale, sânge sau alte tipuri de probe.

Există modele de moștenire previzibile în anumite locații (numite loci) din genomul uman, care s-au dovedit a fi utile în determinarea relațiilor identitare și biologice. Acești loci conțin markeri ADN specifici pe care oamenii de știință îi folosesc pentru a identifica indivizii. Într-un test de paternitate ADN de rutină, markerii utilizați sunt repetări scurte în tandem (STR), bucăți scurte de ADN care apar în modele de repetare foarte diferențiale în rândul indivizilor.

ADN-ul fiecărei persoane conține două copii ale acestor markeri - o copie moștenită de la tată și una de la mamă. În cadrul unei populații, markerii de la locația ADN a fiecărei persoane ar putea diferi în lungime și uneori în secvență, în funcție de markerii moșteniți de la părinți.

Combinația de mărimi a markerului găsită la fiecare persoană alcătuiește profilul genetic unic al acestora. Atunci când se determină relația dintre doi indivizi, profilurile lor genetice sunt comparate pentru a vedea dacă împărtășesc aceleași tipare de moștenire la o rată statistic concludentă.

De exemplu, următorul exemplu de raport din acest laborator comercial de testare a paternității ADN-ului Universal Genetics semnifică modul în care relația dintre părinți și copil este identificată pe acești markeri speciali:

Marker ADN	Mamă	Copil	Presupus tată
D21S11	28, 30	28, 31.2	29, 31.2
D7S820	9, 10	10, 11	11, 12
TH01	6, 9.3	9, 9.3	8, 9
D13S317	10, 12	12, 13	11, 13
D19S433	14, 16.2	14, 15	14.2, 15

Rezultatele parțiale indică faptul că copilul și ADN-ul presupusului tată se potrivesc printre acești cinci markeri. Rezultatele complete ale testului arată această corelație pe 16 markeri între copil și bărbatul testat pentru a permite să se tragă o concluzie dacă bărbatul este sau nu tatăl biologic.

Fiecărui marker i se atribuie un indice de paternitate (PI), care este o măsură statistică a cât de puternic o potrivire la un anumit marker indică paternitatea. PI al fiecărui marker este înmulțit unul cu celălalt pentru a genera Indicele Paternității Combinate (IPC), care indică probabilitatea globală ca un individ să fie tată biologic al copilului testat față de un bărbat selectat aleatoriu din întreaga populație din aceeași rasă . IPC este apoi transformat într-o probabilitate de paternitate care arată gradul de legătură dintre presupusul tată și copil.

Raportul testului ADN din alte teste de relație de familie, cum ar fi testele de bunic și frate, este similar cu un raport de test de paternitate. În loc de indicele de paternitate combinat, este raportată o valoare diferită, cum ar fi un indice de fraternitate.

Raportul prezintă profilurile genetice ale fiecărei persoane testate. Dacă există markeri împărțiți între indivizii testați, probabilitatea relației biologice este calculată pentru a determina cât de probabil persoanele testate împărtășesc aceiași markeri datorită unei relații de sânge.

Analiza cromozomului Y

Inovațiile recente au inclus crearea de primeri care vizează regiunile polimorfe de pe cromozomul Y ( Y-STR ), care permite rezolvarea unei probe mixte de ADN de la un bărbat și o femeie sau cazuri în care nu este posibilă o extracție diferențială . Cromozomii Y sunt moșteniți patern, astfel încât analiza Y-STR poate ajuta la identificarea bărbaților înrudiți patern. Analiza Y-STR a fost efectuată în cadrul controversei Jefferson-Hemings pentru a determina dacă Thomas Jefferson a creat un fiu cu unul dintre sclavii săi.

Analiza cromozomului Y produce rezultate mai slabe decât analiza cromozomului autozomal în ceea ce privește identificarea individuală. Cromozomul determinant al sexului masculin Y, deoarece este moștenit doar de bărbați de la părinții lor, este aproape identic de-a lungul liniei paterne. Pe de altă parte, haplotipul Y-STR oferă informații genealogice puternice, deoarece o relație patriliniară poate fi urmărită de-a lungul multor generații.

Mai mult, datorită moștenirii paterne, haplotipurile Y oferă informații despre ascendența genetică a populației masculine. Pentru a investiga acest istoric al populației și pentru a furniza estimări pentru frecvențele haplotipului în cazurile penale, „baza de date de referință a haplotipului Y (YHRD)” a fost creată în 2000 ca resursă online. În prezent, cuprinde peste 300.000 de haplotipuri minime (8 locus) de la populațiile din întreaga lume.

Analiza mitocondrială

Pentru eșantioane foarte degradate, uneori este imposibil să se obțină un profil complet al celor 13 STR CODIS. În aceste situații, ADN-ul mitocondrial (ADNmt) este uneori tastat din cauza faptului că există multe copii ale ADNmt într-o celulă, în timp ce pot exista doar 1-2 copii ale ADN-ului nuclear. Oamenii de știință criminaliști amplifică regiunile HV1 și HV2 ale ADNmt, apoi secvenționează fiecare regiune și compară diferențele cu un singur nucleotid cu o referință. Deoarece ADNmt este moștenit matern, rudele materne legate direct pot fi folosite ca referințe de potrivire, cum ar fi fiul fiicei bunicii materne. În general, o diferență de două sau mai multe nucleotide este considerată a fi o excludere. Diferențele de heteroplasmie și poli-C pot arunca comparații secvențiale directe, deci este necesară o anumită expertiză din partea analistului. ADNmt este util în determinarea identităților clare, cum ar fi cele ale persoanelor dispărute atunci când se poate găsi o rudă legată de mamă. Testarea ADNmt a fost utilizată pentru a stabili că Anna Anderson nu era prințesa rusă pe care susținuse că este, Anastasia Romanov .

ADNmt poate fi obținut din materiale precum arbori de păr și oase / dinți vechi. Mecanism de control bazat pe punctul de interacțiune cu datele. Acest lucru poate fi determinat de plasarea instrumentată în eșantion.

Probleme cu probele de ADN criminalistic

Când oamenii se gândesc la analiza ADN-ului, se gândesc adesea la emisiuni precum NCIS sau CSI, care prezintă probe de ADN care intră într-un laborator și apoi sunt analizate instantaneu, urmate de extragerea imaginii suspectului în câteva minute⁠. Cu toate acestea, adevărata realitate este destul de diferită și eșantioanele perfecte de ADN nu sunt adesea colectate de la locul crimei. Victimele omuciderilor sunt lăsate în mod frecvent expuse condițiilor dure înainte de a fi găsite, iar obiectele folosite pentru comiterea infracțiunilor au fost deseori manipulate de mai multe persoane. Cele mai frecvente două probleme pe care le întâmpină oamenii de știință în analiza probelor de ADN sunt probele degradate și amestecurile de ADN.

ADN degradat

În lumea reală laboratoarele de ADN trebuie adesea să se ocupe de probe de ADN care sunt mai puțin decât ideale. Probele de ADN prelevate din scenele crimei sunt adesea degradate, ceea ce înseamnă că ADN-ul a început să se descompună în fragmente mai mici . Este posibil ca victimele omuciderilor să nu fie descoperite imediat și, în cazul unui accident în masă, ar putea fi greu să obțineți probe de ADN înainte ca ADN-ul să fie expus la elemente de degradare.

Degradarea sau fragmentarea ADN-ului la locul crimei poate apărea din mai multe motive, expunerea la mediu fiind deseori cea mai frecventă cauză. Probele biologice care au fost expuse mediului pot fi degradate de apă și enzime numite nucleaze . Nucleazele „mestecă” ADN-ul în fragmente în timp și se găsesc peste tot în natură.

Înainte de a exista metode moderne de PCR, era aproape imposibil să analizăm probe de ADN degradate. Metode cum ar fi polimorfismul lungimii fragmentelor de restricție sau RFLP fragmentului de restricție polimorfismul lungimii , care a fost prima tehnica utilizată pentru analiza ADN - ului în domeniul științei criminalistice, ADN - ul cu greutate moleculară ridicată necesară în eșantion , în scopul de a obține date fiabile. ADN-ul cu greutate moleculară mare este totuși ceva care lipsește în probele degradate, deoarece ADN-ul este prea fragmentat pentru a efectua cu precizie RFLP. Abia până când au fost inventate tehnicile moderne de PCR, analiza probelor de ADN degradate a putut fi efectuată cu reacția în lanț a polimerazei . Multiplex PCR în special a făcut posibilă izolarea și amplificarea fragmentelor mici de ADN rămase încă în probele degradate. Când metodele PCR multiplex sunt comparate cu metodele mai vechi, cum ar fi RFLP, se poate observa o diferență mare. Multiplex PCR poate amplifica teoretic mai puțin de 1 ng de ADN, în timp ce RFLP trebuia să aibă cel puțin 100 ng de ADN pentru a efectua o analiză.

În ceea ce privește o abordare criminalistică a unei probe de ADN degradate, analiza STR loci STR este adesea amplificată utilizând metode bazate pe PCR. Deși locurile STR sunt amplificate cu o probabilitate mai mare de succes cu ADN degradat, există încă posibilitatea ca locurile STR mai mari să nu reușească să se amplifice și, prin urmare, ar produce probabil un profil parțial, ceea ce are ca rezultat o greutate statistică redusă a asocierii în caz de o potrivire.

Analiza MiniSTR

În cazurile în care probele de ADN sunt degradate, ca în cazul incendiilor intense sau dacă tot ce rămâne sunt fragmente osoase, testarea STR standard pe aceste probe poate fi inadecvată. Când testarea STR standard se face pe eșantioane foarte degradate, locii STR mai mari renunță adesea și se obțin doar profiluri ADN parțiale. În timp ce profilurile ADN parțiale pot fi un instrument puternic, probabilitățile de potrivire aleatorie vor fi mai mari decât dacă s-ar obține un profil complet. O metodă care a fost dezvoltată pentru a analiza probele de ADN degradate este utilizarea tehnologiei miniSTR. În această nouă abordare, grundurile sunt special concepute pentru a se lega mai aproape de regiunea STR. În testarea STR normală, primerii se vor lega de secvențe mai lungi care conțin regiunea STR din segment. Cu toate acestea, analiza MiniSTR va viza doar locația STR, iar acest lucru are ca rezultat un produs ADN care este mult mai mic.

Prin plasarea primerilor mai aproape de regiunile STR reale, există o șansă mai mare ca amplificarea cu succes a acestei regiuni să aibă loc. Amplificarea cu succes a acestor regiuni STR poate avea loc acum și pot fi obținute profiluri de ADN mai complete. Succesul că produsele PCR mai mici produc o rată de succes mai mare cu eșantioane foarte degradate a fost raportat pentru prima dată în 1995, când tehnologia miniSTR a fost utilizată pentru a identifica victimele incendiului de la Waco. În acest caz, incendiul a distrus eșantioanele de ADN atât de grav, încât testarea normală a STR nu a dus la identificarea pozitivă a unora dintre victime.

Amestecuri de ADN

Amestecurile sunt o altă problemă obișnuită cu care se confruntă cercetătorii legali atunci când analizează probe de ADN necunoscute sau discutabile. Un amestec este definit ca o probă de ADN care conține doi sau mai mulți contribuabili individuali. Acest lucru poate apărea adesea atunci când o probă de ADN este prelevată dintr-un articol manipulat de mai multe persoane sau când o probă conține atât ADN-ul victimei, cât și cel al agresorilor. Prezența mai multor persoane într-o probă de ADN poate face dificilă detectarea profilurilor individuale, iar interpretarea amestecurilor ar trebui făcută numai de indivizi cu înaltă pregătire. Amestecurile care conțin doi sau trei indivizi pot fi interpretate, deși va fi dificil. Amestecurile care conțin patru sau mai multe persoane sunt mult prea complicate pentru a obține profiluri individuale. Un scenariu comun în care se obține adesea un amestec este în cazul agresiunii sexuale. Se poate colecta un eșantion care conține materiale de la victimă, partenerii sexuali consensuali ai victimei și făptașul (autorii).

Pe măsură ce metodele de detecție în profilarea ADN avansează, cercetătorii legaliști văd mai multe probe de ADN care conțin amestecuri, deoarece chiar și cel mai mic contribuitor poate fi acum detectat prin teste moderne. Ușurința în care oamenii de știință criminalisti au amestecuri de ADN interpenetrante depinde în mare măsură de raportul ADN-ului prezent de la fiecare individ, de combinațiile de genotip și de cantitatea totală de ADN amplificat. Raportul ADN este adesea cel mai important aspect de luat în considerare pentru a determina dacă un amestec poate fi interpretat. De exemplu, în cazul în care o probă de ADN a avut doi contribuabili, ar fi ușor să se interpreteze profilurile individuale dacă raportul de ADN contribuit de o persoană a fost mult mai mare decât a doua persoană. Când un eșantion are trei sau mai mulți colaboratori, devine extrem de dificil să se determine profilurile individuale. Din fericire, progresele în genotiparea probabilistică ar putea face posibil acest tip de determinare în viitor. Genotiparea probabilistică folosește software de calculator complex pentru a rula prin mii de calcule matematice pentru a produce probabilități statistice ale genotipurilor individuale găsite într-un amestec. Software-ul de genotipare probabilistică care este adesea folosit în laboratoare astăzi include STRmix și TrueAllele .

Baze de date ADN

O aplicare timpurie a unei baze de date ADN a fost compilarea unei concordanțe ADN mitocondriale, pregătită de Kevin WP Miller și John L. Dawson la Universitatea din Cambridge din 1996 până în 1999 din datele colectate ca parte a tezei de doctorat a lui Miller. În prezent există mai multe baze de date ADN în întreaga lume. Unele sunt private, dar cele mai mari baze de date sunt controlate de guvern. Statele Unite menține cea mai mare baza de date ADN , cu sistem de indexare a ADN - ului combinat (CODIS) care deține peste 13 de milioane de discuri din luna mai 2018. Regatul Unit menține date , DNA (NDNAD), care este de dimensiuni similare, în ciuda anilor Marea Britanie mai mici populației. Mărimea acestei baze de date și rata de creștere a acesteia îngrijorează grupurile de libertăți civile din Marea Britanie, unde poliția are competențe extinse de a preleva eșantioane și de a le păstra chiar și în caz de achitare. Coaliția Conservator-Liberal Democrat a abordat parțial aceste preocupări cu partea 1 din Legea privind protecția libertăților din 2012 , conform căreia probele de ADN trebuie șterse în cazul în care suspecții sunt achitați sau nu sunt acuzați, cu excepția anumitor infracțiuni (mai ales grave și / sau sexuale) . Discursul public cu privire la introducerea tehnicilor criminalistice avansate (cum ar fi genealogia genetică utilizând baze de date de genealogie publică și abordările de fenotipare a ADN-ului) a fost limitat, disartat, nefocalizat și ridică probleme de confidențialitate și consimțământ care pot justifica stabilirea unor protecții juridice suplimentare.

Actul SUA Patriot din Statele Unite oferă un mijloc pentru guvernul SUA pentru a obține mostre de ADN de la presupușii teroriști. Informațiile ADN din infracțiuni sunt colectate și depozitate în baza de date CODIS , care este întreținută de FBI . CODIS permite oficialilor de aplicare a legii să testeze mostre de ADN din infracțiuni pentru meciuri în baza de date, oferind un mijloc de a găsi profiluri biologice specifice asociate cu probele ADN colectate.

Atunci când se face o potrivire dintr-o bază de date națională ADN pentru a lega o scenă a crimei de un infractor care a furnizat un eșantion de ADN la o bază de date, acea legătură este adesea denumită o lovitură rece . Un succes rece are o valoare în trimiterea agenției de poliție la un suspect, dar are o valoare mai puțin evidentă decât o potrivire ADN făcută din afara bazei de date ADN.

Agenții FBI nu pot stoca legal ADN-ul unei persoane care nu este condamnată pentru o infracțiune. ADN-ul colectat de la un suspect care nu a fost condamnat ulterior trebuie eliminat și nu introdus în baza de date. În 1998, un bărbat care locuia în Marea Britanie a fost arestat sub acuzația de efracție. ADN-ul său a fost luat și testat, iar ulterior a fost eliberat. Nouă luni mai târziu, ADN-ul acestui bărbat a fost introdus accidental și ilegal în baza de date ADN. ADN-ul nou este comparat automat cu ADN-ul găsit în cazurile reci și, în acest caz, s-a găsit că acest om se potrivea cu ADN-ul găsit la un caz de viol și agresiune cu un an mai devreme. Guvernul l-a urmărit apoi pentru aceste infracțiuni. În timpul procesului, s-a solicitat eliminarea din probă a meciului DNA, deoarece a fost introdus ilegal în baza de date. Cererea a fost îndeplinită. ADN-ul făptuitorului, colectat de la victimele violului, poate fi păstrat ani de zile până la găsirea unui chibrit. În 2014, pentru a aborda această problemă, Congresul a extins un proiect de lege care ajută statele să facă față „unui restant” de dovezi.

Considerații la evaluarea dovezilor ADN

Întrucât profilarea ADN a devenit o dovadă cheie în instanță, avocații apărării și-au bazat argumentele pe raționamente statistice . De exemplu: Având în vedere un meci care avea o probabilitate de 1 din 5 milioane de a se întâmpla întâmplător, avocatul ar susține că acest lucru înseamnă că într-o țară de 60 de milioane de persoane, există 12 persoane care ar corespunde și profilului. Acest lucru a fost apoi tradus într-o șansă de 1 din 12 ca suspectul să fie vinovat. Acest argument nu este valid decât dacă suspectul a fost extras la întâmplare din populația țării. De fapt, un juriu ar trebui să ia în considerare cât de probabil este că o persoană care corespunde profilului genetic ar fi fost, de asemenea, suspect în caz din alte motive. De asemenea, diferite procese de analiză a ADN-ului pot reduce cantitatea de recuperare a ADN-ului dacă procedurile nu sunt realizate corect. Prin urmare, numărul de eșantioane de probe poate diminua eficiența colectării ADN-ului. Un alt argument statistic fals se bazează pe presupunerea falsă că o probabilitate de 1 la 5 milioane de meci se traduce automat într-o probabilitate de nevinovăție la 1 din 5 milioane și este cunoscută sub numele de eroare a procurorului .

Atunci când se utilizează RFLP , riscul teoretic al unei potriviri coincidente este de 1 din 100 miliarde (100.000.000.000), deși riscul practic este de fapt 1 din 1000 deoarece gemenii monozigoți reprezintă 0,2% din populația umană. Mai mult, rata de eroare de laborator este aproape sigur mai mare decât aceasta și adesea procedurile efective de laborator nu reflectă teoria în baza căreia au fost calculate probabilitățile de coincidență. De exemplu, probabilitățile de coincidență pot fi calculate pe baza probabilităților că markerii din două eșantioane au benzi exact în aceeași locație, dar un lucrător de laborator poate concluziona că modele de benzi similare - dar nu exact identice - rezultă din eșantioane genetice identice cu o anumită imperfecțiune. în gelul de agaroză. Cu toate acestea, în acest caz, lucrătorul de laborator crește riscul de coincidență prin extinderea criteriilor de declarare a unui meci. Studii recente au citat rate de eroare relativ ridicate, care ar putea fi un motiv de îngrijorare. În primele zile ale amprentării genetice, datele populației necesare pentru a calcula cu exactitate o probabilitate de potrivire erau uneori indisponibile. Între 1992 și 1996, plafoanele scăzute arbitrare au fost controversate pe probabilitățile de potrivire utilizate în analiza RFLP, mai degrabă decât pe cele superioare calculate teoretic. Astăzi, RFLP a devenit dezafectat pe scară largă datorită apariției unor tehnologii mai discriminatorii, sensibile și mai ușoare.

Din 1998, sistemul de profilare a ADN-ului susținut de National DNA Database din Marea Britanie este sistemul de profilare a ADN-ului SGM + care include 10 regiuni STR și un test care indică sexul. STR nu suferă de o astfel de subiectivitate și oferă o putere similară de discriminare (1 din 10 ¹³ pentru indivizii fără legătură dacă utilizează un profil SGM + complet ). Cifrele de această magnitudine nu sunt considerate a fi suportabile statistic de către oamenii de știință din Marea Britanie; pentru indivizii fără legătură cu profiluri ADN complet potrivite, o probabilitate de potrivire de 1 dintr-un miliard este considerată statistic susținută. Cu toate acestea, cu orice tehnică ADN, juratul precaut nu ar trebui să condamne doar pe baza probelor genetice dacă alți factori ridică îndoieli. Contaminarea cu alte dovezi (transfer secundar) este o sursă cheie de profiluri incorecte ale ADN-ului și ridicarea îndoielilor cu privire la faptul că o probă a fost adulterată este o tehnică de apărare preferată. Mai rar, himerismul este un astfel de caz în care lipsa unei potriviri genetice poate exclude pe nedrept un suspect.

Dovezi ale relației genetice

Este posibil să se utilizeze profilarea ADN ca dovadă a relației genetice, deși o astfel de dovadă variază în ceea ce privește puterea de la slab la pozitiv. Testarea care nu arată nicio relație este absolut sigură. Mai mult, în timp ce aproape toți indivizii au un set unic și distinct de gene, indivizii ultra-rari, cunoscuți sub numele de „ himere ”, au cel puțin două seturi diferite de gene. Au existat două cazuri de profilare a ADN-ului care au sugerat în mod fals că o mamă nu are legătură cu copiii ei. Acest lucru se întâmplă atunci când două ouă sunt fertilizate în același timp și se fuzionează împreună pentru a crea un individ în loc de gemeni.

Dovezi false de ADN

Într-un caz, un criminal a plantat probe ADN false în propriul său corp: John Schneeberger a violat unul dintre pacienții săi sedați în 1992 și a lăsat material seminal pe lenjeria ei intimă. Poliția a extras ceea ce credea că este sângele lui Schneeberger și a comparat ADN-ul acestuia cu ADN-ul materialului seminal de la locul crimei în trei ocazii, fără a arăta niciodată un meci. S-a dovedit că a introdus chirurgical un canal de scurgere Penrose în braț și l-a umplut cu sânge străin și anticoagulante .

Analiza funcțională a genelor și a secvențelor lor de codificare ( cadrele de citire deschise [ORF]) necesită de obicei ca fiecare ORF să fie exprimat, proteina codificată purificată, anticorpii produși, fenotipurile examinate, localizarea intracelulară determinată și interacțiunile cu alte proteine căutate. Într-un studiu realizat de compania de științe a vieții Nucleix și publicat în revista Forensic Science International , oamenii de știință au descoperit că o probă sintetică in vitro de ADN care corespunde oricărui profil genetic dorit poate fi construită folosind tehnici standard de biologie moleculară fără a obține țesuturi reale de la acea persoană. . Nucleix susține că pot dovedi, de asemenea, diferența dintre ADN-ul nealterat și cel care a fost sintetizat.

În cazul Phantom of Heilbronn , detectivii de poliție au găsit urme de ADN de la aceeași femeie pe diferite scene de crime din Austria, Germania și Franța - printre care crime, spargeri și jafuri. Abia după ce ADN-ul „femeii” s-a potrivit cu ADN-ul prelevat din corpul ars al unui bărbat solicitant de azil din Franța, detectivii au început să aibă îndoieli serioase cu privire la dovezile ADN. În cele din urmă s-a descoperit că urme de ADN erau deja prezente pe tampoanele de bumbac folosite pentru colectarea probelor la locul faptei, iar tampoanele fuseseră produse în aceeași fabrică din Austria. Caietul de sarcini al companiei spunea că tampoanele erau garantate pentru a fi sterile , dar nu lipsite de ADN.

Dovezi ADN în procesele penale

Căutarea ADN-ului familial

Căutarea ADN-ului familial (denumită uneori „căutarea ADN-ului familial” sau „căutarea bazei de date a ADN-ului familial”) este practica de a crea noi piste de investigație în cazurile în care dovezile ADN găsite la locul unei infracțiuni (profilul criminalistic) seamănă puternic cu cea a unui existent Profil ADN (profilul infractorului) într-o bază de date ADN de stat, dar nu există o potrivire exactă. După ce s-au epuizat toate celelalte oportunități, anchetatorii pot utiliza software special dezvoltat pentru a compara profilul criminalistic cu toate profilurile preluate din baza de date ADN a unui stat pentru a genera o listă cu acei infractori deja aflați în baza de date care sunt cel mai probabil să fie o rudă foarte apropiată a individul al cărui ADN se află în profilul criminalistic. Pentru a elimina majoritatea acestei liste atunci când ADN-ul criminalist este al unui om, tehnicienii din laboratorul criminalității efectuează analize Y-STR . Folosind tehnici de investigație standard, autoritățile sunt capabile să construiască apoi un arbore genealogic. Arborele genealogic este populat din informațiile culese din dosarele publice și din dosarele justiției penale. Anchetatorii exclud implicarea membrilor familiei în infracțiune prin găsirea unor factori excluzibili precum sexul, trăirea în afara statului sau încarcerarea la comiterea infracțiunii. Aceștia pot folosi, de asemenea, alte piste din caz, cum ar fi declarațiile martorului sau ale victimei, pentru a identifica un suspect. Odată ce un suspect a fost identificat, anchetatorii caută să obțină legal o probă de ADN de la suspect. Profilul ADN suspect este apoi comparat cu eșantionul găsit la locul crimei pentru a identifica definitiv suspectul drept sursa ADN-ului locului crimei.

Căutarea bazei de date ADN familiale a fost folosită pentru prima dată într-o anchetă care a condus la condamnarea lui Jeffrey Gafoor pentru asasinarea lui Lynette White în Regatul Unit la 4 iulie 2003. Dovezile ADN au fost potrivite cu nepotul lui Gafoor, care la 14 ani nu se născuse la momentul crimei din 1988. A fost folosit din nou în 2004 pentru a găsi un bărbat care a aruncat o cărămidă de pe un pod de autostradă și a lovit un șofer de camion, ucigându-l. ADN-ul găsit pe cărămidă se potrivea cu cel găsit la locul furtului unei mașini mai devreme în cursul zilei, dar nu existau potriviri bune pe baza de date națională ADN. O căutare mai amplă a găsit o potrivire parțială cu o persoană; la interogare, acest bărbat a dezvăluit că are un frate, Craig Harman, care locuia foarte aproape de locul inițial al crimei. Harman a trimis în mod voluntar o probă de ADN și a mărturisit când s-a potrivit cu proba din cărămidă. În prezent, căutarea bazei de date ADN familial nu este efectuată la nivel național în Statele Unite, unde statele determină cum și când să efectueze căutări familiale. Prima căutare familială a ADN-ului cu o condamnare ulterioară în Statele Unite a fost efectuată în Denver , Colorado, în 2008, utilizând software-ul dezvoltat sub conducerea procurorului districtual Denver Mitch Morrissey și a directorului Departamentului de Poliție din Denver, Laboratorul de criminalitate Gregg LaBerge. California a fost primul stat care a pus în aplicare o politică de căutare familială sub procurorul general de atunci, acum guvernator, Jerry Brown . În rolul său de consultant al Grupului de lucru pentru căutarea familială din cadrul Departamentului de Justiție din California , fostul procuror al județului Alameda, Rock Harmon, este considerat a fi catalizatorul adoptării tehnologiei de căutare familială în California. Tehnica a fost folosită pentru a prinde criminalul în serie din Los Angeles, cunoscut sub numele de „ Grim Sleeper ”, în 2010. Nu un martor sau un informator care a dezvăluit forțele de ordine către identitatea criminalului în serie „Grim Sleeper”, care eludase poliția de mai bine de două decenii, dar ADN de la propriul fiu al suspectului. Fiul suspectului a fost arestat și condamnat într-o acuzație de arme grave și prelevat ADN-ul cu anul anterior. Când ADN-ul său a fost introdus în baza de date a infractorilor condamnați, detectivii au fost alertați cu privire la o potrivire parțială cu dovezile găsite pe scenele crimei „Grim Sleeper”. David Franklin Jr., cunoscut și sub numele de „Somnul somnoros”, a fost acuzat de zece acuzații de crimă și unul de tentativă de crimă. Mai recent, ADN-ul familial a condus la arestarea lui Elvis Garcia, în vârstă de 21 de ani, sub acuzația de agresiune sexuală și închisoare falsă a unei femei în Santa Cruz în 2008. În martie 2011, guvernatorul Virginiei, Bob McDonnell, a anunțat că Virginia va începe să folosească percheziții ADN familiale. . Se așteaptă să urmeze și alte state.

La o conferință de presă din Virginia, la 7 martie 2011, cu privire la violatorul de pe coasta de est , procurorul județului Prince William Paul Ebert și detectivul de poliție din județul Fairfax, John Kelly, au spus că cazul ar fi fost rezolvat în urmă cu ani, dacă Virginia ar fi folosit căutarea ADN-ului familial. Aaron Thomas, presupusul violator de pe Coasta de Est, a fost arestat în legătură cu violul a 17 femei din Virginia până în Rhode Island, dar ADN-ul familial nu a fost utilizat în acest caz.

Criticii căutărilor de baze de date ADN familiale susțin că tehnica este o invazie a drepturilor unui al patrulea amendament al unei persoane . Avocații confidențialității solicită restricții privind baza de date ADN, susținând că singura modalitate echitabilă de a căuta posibile potriviri ADN cu rudele infractorilor sau arestaților ar fi să ai o bază de date ADN la nivelul întregii populații. Unii cercetători au subliniat că preocupările privind confidențialitatea în jurul căutării familiale sunt similare în unele privințe cu alte tehnici de căutare a poliției și majoritatea au ajuns la concluzia că practica este constituțională. Circuitul Curtea al IX - lea de Apel din Statele Unite ale Americii v. Pool (eliberat ca discuție) a sugerat că această practică este oarecum analog cu un martor uita la o fotografie a unei persoane și care menționează că arăta ca făptuitorul, ceea ce duce de aplicare a legii pentru a arăta asista la fotografii ale unor persoane cu aspect similar, dintre care unul este identificat ca făptaș. Indiferent dacă căutarea familială a ADN-ului a fost metoda utilizată pentru identificarea suspectului, autoritățile efectuează întotdeauna un test ADN normal pentru a se potrivi ADN-ul suspectului cu cel al ADN-ului lăsat la locul faptei.

Criticii susțin, de asemenea, că profilarea rasială ar putea avea loc din cauza testării ADN-ului familial. În Statele Unite, ratele de condamnare a minorităților rasiale sunt mult mai mari decât cele ale populației generale. Nu este clar dacă acest lucru se datorează discriminării din partea ofițerilor de poliție și a instanțelor judecătorești, spre deosebire de o rată simplă mai mare de infracțiuni în rândul minorităților. Bazele de date bazate pe arest, care se găsesc în majoritatea Statelor Unite, conduc la un nivel și mai mare de discriminare rasială. O arestare, spre deosebire de condamnare, se bazează mult mai mult pe discreția poliției.

De exemplu, anchetatorii de la Procuratura din Denver au identificat cu succes un suspect într-un caz de furt de proprietate folosind o căutare familială a ADN-ului. În acest exemplu, sângele suspectului lăsat la locul crimei seamănă puternic cu cel al unui prizonier actual al Departamentului de corecție din Colorado . Utilizând înregistrări disponibile publicului, anchetatorii au creat un arbore genealogic. Apoi au eliminat toți membrii familiei care erau închiși în momentul comiterii infracțiunii, precum și pe toate femeile (profilul ADN-ului locului crimei era cel al unui bărbat). Anchetatorii au obținut un ordin judecătoresc pentru colectarea ADN-ului suspectului, însă suspectul s-a oferit de fapt să vină la o secție de poliție și să dea o probă de ADN. După furnizarea eșantionului, suspectul a mers liber fără alte interogări sau rețineri. Ulterior confruntat cu o potrivire exactă cu profilul criminalistic, suspectul a pledat vinovat de infracțiune penală la prima dată a instanței și a fost condamnat la doi ani de probă.

În Italia a fost efectuată o percheziție familiară a ADN-ului pentru a rezolva cazul asasinării Yarei Gambirasio al cărei cadavru a fost găsit în tufiș la trei luni de la dispariția ei. S-a găsit o urmă de ADN pe lenjeria intimă a adolescentului ucis în apropiere și a fost solicitată o probă de ADN de la o persoană care locuia lângă municipiul Brembate di Sopra, iar un strămoș comun a fost găsit în proba de ADN a unui tânăr neimplicat în crimă. După o lungă anchetă, tatăl presupusului ucigaș a fost identificat ca Giuseppe Guerinoni, un bărbat decedat, dar cei doi fii ai săi născuți din soția sa nu au fost înrudiți cu probele de ADN găsite pe corpul lui Yara. După trei ani și jumătate, ADN-ul găsit pe lenjeria intimă a fetei decedate a fost asociat cu Massimo Giuseppe Bossetti, care a fost arestat și acuzat de uciderea fetei de 13 ani. În vara anului 2016, Bossetti a fost găsit vinovat și condamnat la viață de către Corte d'assise din Bergamo.

Meciuri parțiale

Potrivirile ADN parțiale sunt rezultatul unor căutări CODIS de severitate moderată care produc o potrivire potențială care împarte cel puțin o alelă la fiecare locus . Potrivirea parțială nu implică utilizarea unui software de căutare familială, cum ar fi cele utilizate în Marea Britanie și Statele Unite, sau analize Y-STR suplimentare și, prin urmare, de multe ori lipsesc relațiile dintre frați. Corelarea parțială a fost utilizată pentru a identifica suspecții în mai multe cazuri din Marea Britanie și Statele Unite și a fost folosită și ca instrument de exonerare a acuzatului fals. Darryl Hunt a fost condamnat pe nedrept în legătură cu violul și asasinarea unei tinere în 1984 în Carolina de Nord. Hunt a fost exonerat în 2004, când o căutare în baza de date ADN a produs o potrivire remarcabil de strânsă între un criminal condamnat și profilul criminalistic din caz. Meciul parțial i-a condus pe anchetatori la fratele criminalului, Willard E. Brown, care a mărturisit crima când a fost confruntat de poliție. Un judecător a semnat apoi un ordin de respingere a cazului împotriva lui Hunt. În Italia, potrivirea parțială a fost utilizată în controversata crimă a Yarei Gambirasio , o copilă găsită moartă la aproximativ o lună după presupusa răpire. În acest caz, meciul parțial a fost folosit ca singurul element incriminator împotriva inculpatului, Massimo Bossetti, care a fost ulterior condamnat pentru crimă (așteptând recursul de la Curtea Supremă italiană).

Colectarea subreptă a ADN-ului

Forțele de poliție pot colecta probe de ADN fără știrea unui suspect și le pot folosi ca probe. Legalitatea practicii a fost pusă la îndoială în Australia .

În Statele Unite, a fost acceptat, instanțele hotărând adesea că nu există nicio așteptare a vieții private , citând California împotriva Greenwood (1988), în care Curtea Supremă a considerat că al patrulea amendament nu interzice percheziția și confiscarea fără gunoi a gunoiului. lăsat pentru colectare în afara curtilajului unei case . Criticii acestei practici subliniază că această analogie ignoră faptul că „majoritatea oamenilor nu au nicio idee că riscă să-și predea identitatea genetică poliției, de exemplu, nereușind să distrugă o ceașcă de cafea uzată. Mai mult, chiar dacă își dau seama, există nici o modalitate de a evita abandonarea ADN-ului în public ".

Curtea Supremă a Statelor Unite a decis în Maryland împotriva King (2013) că eșantionarea ADN a deținuților arestați pentru infracțiuni grave este constituțională.

În Marea Britanie , Legea țesuturilor umane din 2004 interzice persoanelor private colectarea secretă de probe biologice (păr, unghii etc.) pentru analiza ADN, dar exceptează anchetele medicale și penale de la interdicție.

Anglia și Țara Galilor

Dovezile unui expert care a comparat probele de ADN trebuie să fie însoțite de dovezi cu privire la sursele probelor și la procedurile de obținere a profilurilor de ADN. Judecătorul trebuie să se asigure că juriul trebuie să înțeleagă semnificația potrivirilor ADN și a nepotrivirilor în profiluri. Judecătorul trebuie să se asigure, de asemenea, că juriul nu confundă probabilitatea de potrivire (probabilitatea ca o persoană care este aleasă la întâmplare să aibă un profil de ADN potrivit pentru eșantionul de la locul faptei) cu probabilitatea ca o persoană cu ADN-ul săvârșit să comită infracțiunea. În 1996, R v. Doheny Phillips LJ a dat acest exemplu de rezumat, care ar trebui să fie adaptat cu atenție faptelor particulare din fiecare caz:

Membrii juriului, dacă acceptați dovezile științifice solicitate de coroană, acest lucru indică faptul că există probabil doar patru sau cinci bărbați albi în Regatul Unit de la care ar fi putut proveni pata de material seminal. Inculpatul este unul dintre ei. Dacă aceasta este poziția, decizia pe care trebuie să o luați, cu privire la toate probele, este dacă sunteți sigur că pârâtul a lăsat acea pată sau dacă este posibil să fi fost unul din acel alt grup mic de bărbați care împărtășesc aceleași caracteristici ale ADN-ului.

Juriile ar trebui să cântărească dovezi contradictorii și coroborative, folosindu-și propriul bun simț și nu folosind formule matematice, cum ar fi teorema lui Bayes , pentru a evita „confuzia, neînțelegerea și judecata greșită”.

Prezentarea și evaluarea dovezilor profilelor ADN parțiale sau incomplete

În R v Bates , Moore-Bick LJ a spus:

Nu putem vedea niciun motiv pentru care dovezile ADN de profil parțial nu ar trebui să fie admisibile, cu condiția ca juriul să fie conștientizat de limitările sale inerente și să li se ofere o explicație suficientă pentru a le permite să o evalueze. Pot exista cazuri în care probabilitatea de potrivire în raport cu toate eșantioanele testate este atât de mare încât judecătorul ar considera valoarea probatorie a acesteia ca fiind minimă și ar decide să excludă probele în exercitarea discreției sale, dar acest lucru nu dă naștere la o nouă întrebare de principiu și poate fi lăsat pentru decizie de la caz la caz. Cu toate acestea, faptul că există, în cazul tuturor probelor de profil parțial, posibilitatea ca o alelă „lipsă” să exculpe în totalitate pe acuzat nu oferă suficiente motive pentru respingerea unor astfel de probe. În multe există o posibilitate (cel puțin teoretică) de a exista dovezi care să-l ajute pe acuzat și poate chiar să-l exculpe cu totul, dar care nu oferă motive pentru excluderea probelor relevante care sunt disponibile și altfel admisibile, deși le face importante pentru a se asigura că juriului li se oferă suficiente informații pentru a le permite să evalueze corect aceste dovezi.

Testarea ADN-ului în Statele Unite

Chimistul CBP citește un profil ADN pentru a determina originea unei mărfuri.

Există legi de stat privind profilarea ADN în toate cele 50 de state ale Statelor Unite . Informații detaliate despre legile bazelor de date din fiecare stat pot fi găsite pe site-ul web al Conferinței Naționale a Legislativelor de Stat .

Dezvoltarea ADN-ului artificial

În august 2009, oamenii de știință din Israel au ridicat serioase îndoieli cu privire la utilizarea ADN de către forțele de ordine ca metodă finală de identificare. Într-o lucrare publicată în revista Forensic Science International: Genetics , cercetătorii israelieni au demonstrat că este posibil să se fabrice ADN într-un laborator, falsificând astfel dovezile ADN-ului. Oamenii de știință au fabricat salivă și probe de sânge, care conțineau inițial ADN de la o altă persoană decât presupusul donator de sânge și salivă.

Cercetătorii au arătat, de asemenea, că, folosind o bază de date ADN, este posibil să se preia informații dintr-un profil și să se producă ADN pentru a se potrivi cu acesta și că acest lucru se poate face fără acces la niciun ADN real de la persoana al cărei ADN îl duplică. Oligo-urile de ADN sintetic necesare pentru procedură sunt frecvente în laboratoarele moleculare.

New York Times l-a citat pe autorul principal, Daniel Frumkin, spunând: „Poți doar să creezi o scenă a crimei ... orice student în biologie ar putea face acest lucru”. Frumkin a perfecționat un test care poate diferenția probele reale de ADN de cele false. Testul său detecteazămodificări epigenetice , în special metilarea ADN-ului . Șaptezeci la sută din ADN-ul din orice genom uman este metilat, ceea ce înseamnă că conținemodificări ale grupului metil într-uncontext dinucleotidic CpG . Metilarea în regiunea promotorului este asociată cu mutarea genelor. ADN-ului sintetic îi lipsește aceastămodificare epigenetică , care permite testului să distingă ADN-ul fabricat de ADN-ul autentic.

Nu se știe câte departamente de poliție, dacă există, folosesc în prezent testul. Niciun laborator de poliție nu a anunțat public că folosește noul test pentru a verifica rezultatele ADN-ului.

Cazuri

A se vedea, de asemenea, Lista suspectilor de autori ai infracțiunilor identificate cu GEDmatch

În 1986, Richard Buckland a fost exonerat, în ciuda faptului că a recunoscut violul și uciderea unui adolescent lângă Leicester , orașul în care a fost dezvoltat pentru prima dată profilarea ADN-ului. Aceasta a fost prima utilizare a amprentelor ADN într-o anchetă penală și prima care a dovedit nevinovăția unui suspect. În anul următor, Colin Pitchfork a fost identificat ca fiind autorul aceleiași crime, pe lângă altul, folosind aceleași tehnici care au eliberat Buckland.
În 1987, amprenta genetică a fost folosită pentru prima dată într-o instanță penală din SUA în procesul unui bărbat acuzat de relații sexuale ilegale cu o femeie în vârstă de 14 ani cu handicap mental, care a născut un copil.
În 1987, violatorul din Florida , Tommie Lee Andrews, a fost prima persoană din Statele Unite care a fost condamnată ca urmare a dovezilor ADN, pentru violarea unei femei în timpul unei spargeri; a fost condamnat la 6 noiembrie 1987 și condamnat la 22 de ani de închisoare.
În 1988, Timothy Wilson Spencer a fost primul bărbat din Virginia care a fost condamnat la moarte prin teste ADN, pentru mai multe acuzații de viol și crimă. El a fost supranumit „Strangularul din partea de sud”, deoarece a ucis victime în partea de sud a Richmond, Virginia. Ulterior a fost acuzat de viol și crimă de gradul I și a fost condamnat la moarte. A fost executat la 27 aprilie 1994. David Vasquez, condamnat inițial pentru una dintre crimele lui Spencer, a devenit primul bărbat din America exonerat pe baza dovezilor ADN.
În 1989, bărbatul din Chicago , Gary Dotson, a fost prima persoană a cărei condamnare a fost anulată folosind dovezi ADN.
În 1990, o crimă violentă a unui tânăr student din Brno a fost primul caz penal din Cehoslovacia soluționat prin dovezi ADN, criminalul fiind condamnat la 23 de ani de închisoare.
În 1991, Allan Legere a fost primul canadian care a fost condamnat ca urmare a dovezilor ADN, pentru patru crime pe care le-a comis în timp ce era prizonier evadat în 1989. În timpul procesului său, apărarea sa a susținut că rezerva de gene relativ superficială din regiune ar putea conduce la fals pozitive.
În 1992, dovezile ADN au fost folosite pentru a demonstra că medicul nazist Josef Mengele a fost îngropat în Brazilia sub numele de Wolfgang Gerhard.
În 1992, ADN-ul dintr-un copac palo verde a fost folosit pentru a-l condamna pe Mark Alan Bogan pentru crimă. S-a constatat că ADN-ul de la păstăile unui copac de la locul crimei se potrivește cu cel al păstăilor de semințe găsite în camionul lui Bogan. Acesta este primul exemplu de ADN vegetal admis într-un dosar penal.
În 1993, Kirk Bloodsworth a fost prima persoană care a fost condamnată pentru crimă și condamnată la moarte , a cărei condamnare a fost anulată folosind dovezi ADN.
Violul și asasinarea lui Mia Zapata din 1993 , solistul trupei de punk din Seattle The Gits , au fost nerezolvate la nouă ani de la crimă. O căutare în baza de date în 2001 nu a reușit, dar ADN-ul criminalului a fost colectat când a fost arestat în Florida pentru furturi și abuzuri domestice în 2002.
Știința a devenit faimoasă în Statele Unite în 1994, când procurorii s-au bazat puternic pe dovezi ADN care ar fi legat OJ Simpson de o crimă dublă . Cazul a scos la iveală, de asemenea, dificultățile de laborator și neplăcerile procedurii de manipulare care pot provoca îndoieli semnificative asupra acestor dovezi.
În 1994, detectivii Royal Canadian Mounted Police (RCMP) au testat cu succes firele de păr de la o pisică cunoscută sub numele de Snowball și au folosit testul pentru a lega un bărbat de asasinarea soției sale, marcând astfel pentru prima dată în istoria criminalistică utilizarea ADN-ul animalului uman pentru a identifica un criminal (ADN-ul vegetal a fost utilizat în 1992, vezi mai sus).
În 1994, afirmația că Anna Anderson era Marea Ducesă Anastasia Nikolaevna din Rusia a fost testată după moartea sa folosind probe de țesut care au fost depozitate la un spital din Charlottesville, Virginia în urma unei proceduri medicale. Țesutul a fost testat folosind amprenta ADN și a arătat că nu are nicio legătură cu Romanovii .
În 1994, Earl Washington, Jr. , din Virginia, a fost condamnat la pedeapsa cu moartea la închisoare pe viață cu o săptămână înainte de data programată de execuție pe baza dovezilor ADN. El a primit o iertare completă în 2000, pe baza unor teste mai avansate. Cazul său este adesea citat de oponenții pedepsei cu moartea .
În 1995, Serviciul Britanic de Științe Juridice a efectuat primul său test de masă al ADN-ului în cadrul anchetei cazului de crimă Naomi Smith .
În 1998, Richard J. Schmidt a fost condamnat pentru tentativă de crimă de gradul al doilea când s-a demonstrat că există o legătură între ADN-ul viral al virusului imunodeficienței umane (HIV) pe care fusese acuzat că l-a injectat în prietena sa și ADN-ul viral de la unul. dintre pacienții săi cu SIDA. Aceasta a fost prima dată când amprenta ADN-ului viral a fost folosită ca dovadă într-un proces penal.
În 1999, Raymond Easton, un om cu dizabilități din Swindon , Anglia, a fost arestat și reținut timp de șapte ore în legătură cu un spargere. El a fost eliberat din cauza unei potriviri inexacte a ADN-ului. ADN-ul său fusese păstrat la dosar după un incident intern fără legătură cu ceva timp înainte.
În 2000, Frank Lee Smith a fost dovedit nevinovat de profilarea ADN a uciderii unei fete de opt ani, după ce a petrecut 14 ani pe coridorul morții în Florida, SUA. Cu toate acestea, el murise de cancer chiar înainte de a se dovedi inocența sa. Având în vedere acest lucru, guvernatorul statului Florida a ordonat ca în viitor orice deținut condamnat la moarte care pretinde nevinovăție să fie supus testelor ADN.
În mai 2000, Gordon Graham la ucis pe Paul Gault la casa sa din Lisburn , Irlanda de Nord. Graham a fost condamnat pentru crimă atunci când ADN-ul său a fost găsit pe o geantă de sport lăsată în casă ca parte a unui truc complicat pentru a sugera că crima a avut loc după ce un spargere a greșit. Graham avea o aventură cu soția victimei în momentul crimei. A fost prima dată când ADN-ul cu număr mic de copii a fost utilizat în Irlanda de Nord.
În 2001, Wayne Butler a fost condamnat pentru asasinarea Celiei Douty . A fost prima crimă din Australia care a fost rezolvată folosind profilarea ADN-ului.
În 2002, cadavrul lui James Hanratty , spânzurat în 1962 pentru „crima A6”, a fost exhumat și au fost analizate probe de ADN din corp și membrii familiei sale. Rezultatele au convins judecătorii Curții de Apel că vinovăția lui Hanratty, care fusese contestată intens de militanți, a fost dovedită „fără îndoială”. Paul Foot și alți militanți au continuat să creadă în inocența lui Hanratty și au susținut că dovezile ADN ar fi putut fi contaminate, menționând că micile probe de ADN din articole de îmbrăcăminte, păstrate într-un laborator de poliție de peste 40 de ani „în condiții care nu satisfac standarde probante moderne ", trebuia să fie supuse unor tehnici de amplificare foarte noi pentru a produce orice profil genetic. Cu toate acestea, niciun alt ADN decât Hanratty nu a fost găsit pe dovezile testate, contrar a ceea ce s-ar fi așteptat dacă dovezile ar fi fost într-adevăr contaminate.
În 2002, testarea ADN-ului a fost folosită pentru exonerarea lui Douglas Echols , un om care a fost condamnat pe nedrept într-un caz de viol din 1986. Echols a fost a 114-a persoană care a fost exonerată prin testarea ADN post-condamnare.
În august 2002, Annalisa Vincenzi a fost împușcată în Toscana . Barmanul Peter Hamkin, în vârstă de 23 de ani, a fost arestat, în Merseyside, în martie 2003, pe baza unui mandat de extrădare audiat la Curtea Magistraturii Bow Street din Londra pentru a stabili dacă ar trebui dus în Italia pentru a se confrunta cu o acuzație de crimă. DNA a „dovedit” că a împușcat-o, dar el a fost aprobat de alte probe.
În 2003, galezul Jeffrey Gafoor a fost condamnat pentru asasinarea lui Lynette White din 1988 , când probele de la locul crimei colectate cu 12 ani mai devreme au fost reexaminate folosind tehnici STR , rezultând un meci cu nepotul său. Acesta poate fi primul exemplu cunoscut al ADN-ului unui individ nevinovat, dar înrudit, folosit pentru a identifica criminalul real, prin „căutare familială”.
În martie 2003, Josiah Sutton a fost eliberat din închisoare după ce a executat patru ani de pedeapsă de doisprezece ani pentru o acuzație de agresiune sexuală. Probele de ADN îndoielnice luate de la Sutton au fost retestate în urma scandalului din laboratorul de crime al Departamentului de Poliție din Houston, care a manipulat greșit dovezile ADN.
În iunie 2003, din cauza noilor dovezi ADN, Dennis Halstead, John Kogut și John Restivo au câștigat un nou proces pentru condamnarea lor de crimă, condamnările lor au fost respinse și au fost eliberați. Cei trei bărbați ispășiseră deja optsprezece ani din pedeapsa lor de treizeci de ani.
Procesul lui Robert Pickton (condamnat în decembrie 2003) este remarcabil prin faptul că dovezile ADN sunt utilizate în primul rând pentru identificarea victimelor și, în multe cazuri, pentru a dovedi existența lor.
În 2004, testarea ADN a aruncat o nouă lumină asupra misterioasei dispariții din 1912 a lui Bobby Dunbar , un băiat de patru ani care a dispărut în timpul unei excursii de pescuit. El ar fi fost găsit în viață opt luni mai târziu în custodia lui William Cantwell Walters, dar o altă femeie a susținut că băiatul era fiul ei, Bruce Anderson, pe care îl încredințase în custodia lui Walters. Instanțele nu au crezut cererea ei și l-au condamnat pe Walters pentru răpire. Băiatul a fost crescut și cunoscut sub numele de Bobby Dunbar tot restul vieții sale. Cu toate acestea, testele ADN pe fiul și nepotul lui Dunbar au dezvăluit că cei doi nu erau înrudiți, stabilind astfel că băiatul găsit în 1912 nu era Bobby Dunbar, a cărui soartă reală rămâne necunoscută.
In 2005, Gary Leiterman a fost condamnat pentru uciderea a 1969 Jane Mixer, un student la drept la Universitatea din Michigan , dupa ce ADN - ul găsit pe mixerului chilot a fost potrivit pentru Leiterman. ADN-ul dintr-o picătură de sânge pe mâna lui Mixer a fost asociat cu John Ruelas, care avea doar patru ani în 1969 și nu a fost niciodată conectat cu succes la caz în niciun alt mod. Apărarea lui Leiterman a susținut fără succes că potrivirea inexplicabilă a petei de sânge cu Ruelas a indicat o contaminare încrucișată și a ridicat îndoieli cu privire la fiabilitatea identificării laboratorului de Leiterman.
În decembrie 2005, Evan Simmons a fost dovedit nevinovat de un atac din 1981 asupra unei femei din Atlanta, după ce a executat douăzeci și patru de ani de închisoare. Domnul Clark este a 164-a persoană din Statele Unite și a cincea din Georgia care a fost eliberată folosind teste ADN post-condamnare.
În noiembrie 2008, Anthony Curcio a fost arestat pentru că a creat una dintre cele mai elaborate jafuri de mașini blindate din istorie. Dovezile ADN l-au legat pe Curcio de crimă.
În martie 2009, Sean Hodgson - condamnat pentru uciderea în 1979 a Teresa De Simone, 22 de ani, în mașina sa din Southampton - a fost eliberat după ce testele au dovedit că ADN-ul de la fața locului nu era al său. Ulterior a fost asociat cu ADN-ul recuperat din corpul exhumat al lui David Lace. Lace a mărturisit anterior crima, dar nu a fost crezut de detectivi. A executat închisoare pentru alte infracțiuni comise în același timp cu crima și apoi sa sinucis în 1988.
În 2012, un caz de schimbare a bebelușilor, cu multe decenii mai devreme, a fost descoperit accidental. După ce a efectuat testarea ADN în alte scopuri, Alice Collins Plebuch a fost sfătuită că strămoșii ei păreau să includă o componentă evreiască askenază semnificativă, în ciuda credinței în familia ei că erau de origine predominant irlandeză. Profilarea genomului lui Plebuch a sugerat că acesta include componente distincte și neașteptate asociate cu populațiile Ashkenazi, Orientul Mijlociu și Europa de Est. Acest lucru l-a determinat pe Plebuch să efectueze o anchetă extinsă, după care ea a concluzionat că tatăl său fusese schimbat, posibil accidental, cu un alt bebeluș, la scurt timp după naștere. Plebuch a reușit, de asemenea, să identifice strămoșii biologici ai tatălui ei.
În 2016 Anthea Ring, abandonată în copilărie, a reușit să folosească un eșantion de ADN și o bază de date de potrivire a ADN-ului pentru a descoperi identitatea și rădăcinile mamei decedate din județul Mayo, Irlanda. Un test criminalistic recent dezvoltat a fost ulterior folosit pentru a captura ADN din saliva lăsată pe ștampile și plicurile vechi de tatăl ei suspect, descoperit prin cercetări genealogice minuțioase. ADN-ul din primele trei probe a fost prea degradat pentru a fi utilizat. Cu toate acestea, pe a patra, s-a găsit ADN mai mult decât suficient. Testul, care are un grad de precizie acceptabil în instanțele din Marea Britanie, a dovedit că un bărbat pe nume Patrick Coyne era tatăl ei biologic.
În 2018 , fata Buckskin (un corp găsit în 1981 în Ohio) a fost identificată ca Marcia King din Arkansas folosind tehnici genealogice de ADN
În 2018, Joseph James DeAngelo a fost arestat ca principal suspect al criminalului Golden State, folosind tehnici de ADN și genealogie.
În 2018, William Earl Talbott II a fost arestat ca suspect pentru asasinarea lui Jay Cook și Tanya Van Cuylenborg din 1987 cu ajutorul testării ADN genealogice . Același genealogist genetic care a ajutat în acest caz a ajutat și poliția cu alte 18 arestări în 2018.
În 2019, rămășițele dezmembrate găsite într-o peșteră din Idaho în 1979 și 1991 au fost identificate prin amprentarea genetică ca aparținând lui Joseph Henry Loveless . Loveless era un criminal obișnuit care dispăruse după ce a scăpat din închisoare în 1916, unde fusese acuzat de uciderea soției sale Agnes cu toporul. Hainele găsite cu rămășițele se potriveau cu descrierea celor pe care îi purta Loveless atunci când a fugit.

Dovezi ADN ca dovezi pentru a dovedi drepturile de succesiune la titlurile britanice

Testarea ADN a fost utilizată pentru a stabili dreptul de succesiune la titlurile britanice.

Cazuri:

Vezi si

ADN satelit

Referințe

Lecturi suplimentare

Kaye, David H. (2010). Helica dublă și legea dovezii . Cambridge, MA: Harvard University Press. ISBN 9780674035881. OCLC 318876881 .
Koerner, Brendan I. (13 octombrie 2015). „Legături de familie: ADN-ul rudelor tale te-ar putea transforma într-un suspect” (hârtie) . Cu fir : 35–38. ISSN 1059-1028 . Adus la 6 iunie 2019 .

linkuri externe

McKie, Robin (24 mai 2009). „Momentul Eureka care a dus la descoperirea amprentelor ADN” . Observatorul . Londra.
Știință criminalistică, statistică și lege - Blog care urmărește evoluțiile științifice și juridice relevante pentru profilarea ADN criminalistică
Creați o amprentă ADN - PBS.org
Simulare in silico a tehnicilor de biologie moleculară - Un loc pentru a învăța tehnici de tastare prin simularea acestora
Baze de date naționale ADN în UE
The Innocence Record , Winston & Strawn LLP / The Innocence Project
Making Sense of DNA Backlogs, 2012: Myths vs. Reality United States Department of Justice
„Sensibilizarea geneticii criminalistice” . 25 ianuarie 2017 . Adus la 19 aprilie 2020 . Sens despre știință

Languages

In other projects