Pata Kinyoun - Kinyoun stain

Metoda Kinyoun sau pata Kinyoun (metoda rece), dezvoltată de Joseph J. Kinyoun , este o procedură utilizată pentru colorarea speciilor cu aciditate rapidă din genurile bacteriene Mycobacterium și Nocardia și din genul apicomplexan Cryptosporidium . Este o variantă a unei metode dezvoltată de Robert Koch în 1882. Anumite specii de bacterii au o lipidă ceară numită acid micolic, în pereții celulari, care le permite să fie colorate cu Acid-Fast mai bine decât o Gram-Stain. Abilitatea unică a micobacteriilor de a rezista decolorării prin alcool acid este motivul pentru care sunt denumite acid-rapide. Aceasta implică aplicarea unei pete primare ( fucsină bazică ), a unui decolorant (acid-alcool) și a unei pete ( albastru de metilen ). Spre deosebire de pata Ziehl – ​​Neelsen ( pata ZN), metoda Kinyoun de colorare nu necesită încălzire. În pata Ziehl – ​​Neelsen, căldura acționează ca un mordant fizic, în timp ce fenolul (carbol de carbol fuschin) acționează ca mordant chimic. Deoarece pata Kinyoun este o metodă rece (nu se aplică căldură), concentrația de carbol fuschin utilizată este crescută.

Rezumatul petei acid-rapide (pata Kinyoun)
Aplicarea Reactiv Culoarea celulei
Acid rapid Neacid rapid
Vopsea primară Carbol fuchsin roșu roșu
Decolorant Alcool acid roșu Incolor
Counter Stain Albastru de metil roșu Albastru

Procedura de colorare

Pata Kinyoun pe organismul Mycobacterium smegmatis

Faceți o pată acidă rapidă

Materiale

  • Glisați cu frotiu de organism
  • Carbol Fuchsin
  • Acid-alcool
  • Albastru de metil
  • hârtie bibuloasă
  • Microscop

Instrucțiuni

  1. Faceți frotiu pe un tobogan cu organisme
    • Curățați diapozitivul, diapozitivul cu etichetă de ceară, răspândiți organismul, uscați-l la aer timp de 10 minute, fixați-l la căldură
  2. Scufundați diapozitivul în Carbol Fuchsin timp de 20 de minute.
  3. Clătiți lamela
  4. Scufundați lamela în alcool acid timp de 3-5 secunde.
  5. Clătiți Slide
  6. Scufundați lamela în albastru de metilen timp de 30 de secunde.
  7. Clătiți Slide
  8. Ștergeți-l cu hârtie bibuloasă.
  9. Observați la microscop.

Modificare

Metoda Kinyoun poate fi modificată ca o pată rapidă de acid slab, care folosește 5% acid sulfuric în loc de acid clorhidric. Colorarea rapidă a acidului slab, în ​​plus față de colorarea micobacteriilor, va colora organismele care nu sunt capabile să mențină carbol fuchsin după decolorare cu HCl.

Vezi si

Referințe

Pictogramă Stub

Acest articol legat de microbiologie este un butuc . Puteți ajuta Wikipedia extinzându-l .