Trombocite - Platelet

Trombocite
Trombocite2.JPG
Imagine dintr-un microscop cu lumină (500 ×) dintr-un frotiu de sânge periferic colorat cu Giemsa care prezintă trombocite (puncte purpurii) înconjurate de globule roșii (structuri circulare roz)
Detalii
Precursor Megacariocite
Funcţie Formarea cheagurilor de sânge; prevenirea sângerării
Identificatori
latin Trombocite
Plasă D001792
FMA 62851
Termeni anatomici ai microanatomiei

Trombocitele , numite și trombocite (din greacă θρόμβος, „cheag” și κύτος, „celulă”), sunt o componentă a sângelui a cărei funcție (împreună cu factorii de coagulare ) este de a reacționa la sângerarea din cauza vătămării vaselor de sânge prin aglomerare, inițind astfel o cheag de sânge . Trombocitele nu au nucleu celular ; ele sunt fragmente de citoplasmă care sunt derivate din megacariocitelor ale măduvei osoase sau plămâni, care apoi intră în circulația. Trombocitele inactivate circulante sunt structuri discoide biconvexe (în formă de lentilă), cu diametrul cel mai mare de 2–3 µm. Trombocitele activate au proiecții ale membranei celulare care le acoperă suprafața. Trombocitele se găsesc numai la mamifere, în timp ce la alte vertebrate (de exemplu , păsări , amfibieni ), trombocitele circulă ca celule mononucleare intacte .

De liganzi , notate prin litera L, semnal de trombocite (P) să migreze spre rana (Site A). Pe măsură ce mai multe trombocite se adună în jurul deschiderii, produc mai mulți liganzi pentru a amplifica răspunsul. Trombocitele se adună în jurul plăgii pentru a crea un capac pentru a opri fluxul de sânge din țesut.

Pe un frotiu de sânge colorat , trombocitele apar ca pete purpurii închise, cu aproximativ 20% diametrul globulelor roșii din sânge. Frotiul este folosit pentru a examina trombocitele pentru dimensiune, formă, număr calitativ și aglomerare . Un adult sănătos are de obicei de 10 până la 20 de ori mai multe globule roșii decât trombocitele. O funcție majoră a trombocitelor este de a contribui la hemostază : procesul de oprire a sângerării la locul endoteliului întrerupt . Se adună la fața locului și, cu excepția cazului în care întreruperea este prea mare din punct de vedere fizic, înfundă gaura. În primul rând, trombocitele se atașează la substanțele din afara endoteliului întrerupt : aderența . În al doilea rând, își schimbă forma, pornesc receptorii și secretă mesageri chimici : activare . În al treilea rând, se conectează între ele prin punți de receptor: agregare . Formarea acestui dop de trombocite (hemostaza primară) este asociată cu activarea cascadei de coagulare , cu depunerea și legarea rezultată a fibrinei (hemostaza secundară). Aceste procese se pot suprapune: spectrul este de la un dop predominant de trombocite, sau „cheag alb” la o fibrină predominant, sau „cheag roșu” sau amestecul mai tipic. Unii ar adăuga retragerea ulterioară și inhibarea trombocitelor ca pașii patru și al cincilea la finalizarea procesului și alții ar adăuga un al șaselea pas, repararea plăgii . Trombocitele participă, de asemenea, la răspunsuri imune atât înnăscute, cât și adaptative. Membrana celulelor trombocitare are receptori pentru colagen. După ruperea peretelui vaselor de sânge, trombocitele sunt expuse și aderă la colagenul din țesutul conjunctiv înconjurător.

Concentrația scăzută de trombocite se numește trombocitopenie și se datorează fie producției scăzute, fie distrugerii crescute . Concentrația crescută de trombocite se numește trombocitoză și este fie congenitală , reactivă (la citokine ), fie datorită producției nereglementate : una dintre neoplasmele mieloproliferative sau alte neoplasme mieloide . O tulburare a funcției plachetare este o trombocitopatie .

Trombocitele normale pot răspunde la o anomalie pe peretele vasului mai degrabă decât la hemoragie, rezultând în adeziune / activare neadecvată a trombocitelor și tromboză : formarea unui cheag în interiorul unui vas intact. Acest tip de tromboză apare prin mecanisme diferite de cele ale unui cheag normal: și anume, extinderea fibrinei trombozei venoase ; extinderea unei plăci arteriale instabile sau rupte, provocând tromboză arterială ; și tromboza microcirculatorie. Un tromb arterial poate obstrucționa parțial fluxul de sânge, provocând ischemie în aval sau îl poate obstrucționa complet, provocând moartea țesutului în aval .

Măsurare

Concentrația trombocitelor este măsurată fie manual cu ajutorul unui hemocitometru , fie prin plasarea sângelui într-un analizor automat de trombocite folosind impedanță electrică , cum ar fi un contor Coulter . Intervalul normal (99% din populația analizată) pentru trombocite la persoanele albe sănătoase este de 150.000 până la 450.000 pe milimetru cub (un mm 3 este egal cu un microlitru). sau 150–450 × 10 9 pe litru. S-a confirmat că intervalul normal este același la vârstnici și la populațiile spaniole .

Numărul de trombocite variază în funcție de indivizi. Intervalul fiziologic normal este de 200.000 până la 500.000 pe microlitru de sânge. Deoarece conțin receptori pentru trombopoietină (proteina care facilitează maturarea megacariocitelor și eliberarea trombocitelor), un număr mai mare de trombocite leagă mai mult proteina. În consecință, există stimulare pentru o mai mare producție de trombopoietină în ficat și rinichi . Aceasta este baza pentru producerea mai multor trombopoietine și, ca rezultat, a mai multor trombocite în fluxul sanguin în timpul procesului de coagulare a sângelui.

Formă

Într-o primă aproximare, forma trombocitelor poate fi considerată similară cu sferoidele oblate , cu un raport de semiax între 2 și 8. Această aproximare este adesea utilizată pentru a modela proprietățile hidrodinamice și optice ale unei populații de trombocite, precum și pentru a restabili parametrii geometrici. de trombocite individuale măsurate prin citometrie în flux. Modele biofizice mai precise ale morfologiei suprafeței trombocitelor, care își modelează forma de la primele principii, fac posibilă obținerea unei geometrii mai realiste a trombocitelor într-o stare calmă și activată.

Structura

Structural, trombocitele pot fi împărțite în patru zone, de la periferice la cele mai interioare:

Dezvoltare

Trombocitele derivă din celule stem totipotente ale măduvei
  • Producția de megacariocite și trombocite este reglementată de trombopoietină , un hormon produs în rinichi și ficat.
  • Fiecare megacariocit produce între 1.000 și 3.000 de trombocite pe parcursul vieții sale.
  • La un adult sănătos se produc zilnic în medie 10 11 trombocite.
  • Trombocitele de rezervă sunt depozitate în splină și sunt eliberate atunci când este nevoie de contracția splenică indusă de sistemul nervos simpatic.
Trombocite extrudate din megacariocite
  • Durata medie de viață a trombocitelor circulante este de 8 până la 9 zile. Durata de viață a trombocitelor individuale este controlată de calea internă de reglare apoptotică, care are un temporizator Bcl-x L.
  • Trombocitele vechi sunt distruse de fagocitoză în splină și ficat.

Hemostaza

Redarea 3D a patru trombocite inactivate și trei activate.

O prezentare generală care rezumă dinamica trombocitelor, procesul complex de transformare a trombocitelor inactive într-un dop de trombocite, este esențială. Complicarea oricărei descrieri verbale este faptul că cel puțin 193 de proteine ​​și 301 de interacțiuni sunt implicate în dinamica trombocitelor. Separarea dinamicii trombocitelor în trei etape este utilă în acest sens, dar este artificială: de fapt, fiecare etapă este inițiată în succesiune rapidă și fiecare continuă până când declanșatorul pentru acea etapă nu mai este prezent, deci există suprapunere.

Adeziune

Formarea trombului pe un endoteliu intact este prevenită de oxid nitric , prostaciclină și CD39 .

Celulele endoteliale sunt atașate la colagenul subendotelial de factorul von Willebrand (VWF), pe care aceste celule îl produc. VWF este, de asemenea, stocat în corpurile Weibel-Palade ale celulelor endoteliale și secretat constitutiv în sânge. Trombocitele stochează vWF în granulele lor alfa.

Când stratul endotelial este întrerupt, colagenul și VWF ancorează trombocitele în subendoteliu. Receptorul trombocit GP1b-IX-V se leagă cu VWF; și receptorul GPVI și integrina α2β1 se leagă de colagen.

Activare

Micrografie electronică de scanare a celulelor sanguine. De la stânga la dreapta: eritrocit uman , trombocit activat, leucocit .

Inhibitie

Căptușeala endotelială intactă inhibă activarea trombocitelor prin producerea de oxid nitric , endotelial- ADPază și IGP 2 (prostaciclină). Endoteliul-ADPaza degradează activatorul de trombocite ADP .

Trombocitele în repaus mențin efluentul activ de calciu printr-o pompă de calciu activată cu AMP ciclic . Concentrația intracelulară de calciu determină starea activării trombocitelor, deoarece este al doilea mesager care determină modificarea conformațională și degranularea trombocitelor (vezi mai jos). Endoteliale prostacilina se leagă la prostaglandinici receptorii de pe suprafața de repaus trombocite. Acest eveniment stimulează proteina Gs cuplată pentru a crește activitatea adenilat ciclazei și crește producția de AMPc, promovând în continuare efluxul de calciu și reducând disponibilitatea intracelulară de calciu pentru activarea trombocitelor.

ADP, pe de altă parte, se leagă de receptorii purinergici de pe suprafața trombocitelor. Deoarece receptorul purinergic trombocitar P2Y12 este cuplat la proteinele Gi , ADP reduce activitatea adenilat ciclazei trombocitelor și producția de AMPc, ducând la acumularea de calciu în plachetă prin inactivarea pompei de eflux de calciu AMPc. Celălalt receptor ADP P2Y1 se cuplează la Gq care activează fosfolipaza C-beta 2 ( PLCB2 ), rezultând inozitol 1,4,5-trisfosfat (IP3) generare și eliberare intracelulară de mai mult calciu. Acest lucru induce împreună activarea trombocitelor. ADPaza endotelială degradează ADP și împiedică acest lucru. Clopidogrelul și medicamentele antiagregante asociate funcționează și ca antagoniști ai receptorului purinergic P2Y12 .

Declanșator (inducție)

Activarea trombocitelor începe la câteva secunde după apariția aderenței. Este declanșat atunci când colagenul din subendoteliu se leagă de receptorii săi ( receptor GPVI și integrină α2β1) pe trombocite. GPVI este asociat cu lanțul gamma al receptorului Fc și conduce prin activarea unei cascade tirozin kinazice în cele din urmă la activarea PLC-gamma2 ( PLCG2 ) și mai multă eliberare de calciu.

Factorul tisular se leagă, de asemenea, de factorul VII din sânge, care inițiază cascada de coagulare extrinsecă pentru a crește producția de trombină . Trombina este un puternic activator de trombocite, care acționează prin Gq și G12. Aceștia sunt receptori cuplați cu proteina G și activează căile de semnalizare mediate de calciu în cadrul trombocitelor, depășind efluxul de calciu inițial. Familii de trei proteine ​​G (Gq, Gi, G12) funcționează împreună pentru activare completă. Trombina promovează, de asemenea, întărirea fibrinei secundare a dopului de trombocite. La rândul său, activarea trombocitelor degranulează și eliberează factorul V și fibrinogenul , potențând cascada de coagulare. Deci, în realitate, procesul de blocare și coagulare a trombocitelor are loc simultan, mai degrabă decât secvențial, fiecare inducându-l pe celălalt pentru a forma trombul reticulat cu fibrină final.

Componente (consecințe)

Activare GPIIb / IIIa

Semnalizarea GPVI mediată de colagen crește producția de tromboxane A2 (TXA2) și scade producția de prostaciclină . Acest lucru se întâmplă prin modificarea fluxului metabolic al căii de sinteză eicosanoidă a trombocitelor , care implică enzimele fosfolipază A2 , ciclooxigenază 1 și tromboxan-A sintază . Trombocitele secretă tromboxanul A2, care acționează asupra propriilor receptori tromboxanici ai trombocitelor de pe suprafața trombocitelor (de unde așa-numitul mecanism „out-in”), și pe cei ai altor trombocite. Acești receptori declanșează semnalizarea intraplachetară, care transformă receptorii GPIIb / IIIa în forma lor activă pentru a iniția agregarea .

Secreția de granule
Diagrama structurii unei trombocite care prezintă granulele

Trombocitele conțin granule dense , granule lambda și granule alfa . Trombocitele activate secretă conținutul acestor granule prin sistemele lor canaliculare către exterior. Simplist, trombocitele legate și activate se degradează pentru a elibera agenți chimiotactici plachetari pentru a atrage mai multe trombocite la locul leziunii endoteliale. Caracteristicile granulei:

Schimbarea morfologiei

După cum se arată prin citometrie în flux și microscopie electronică, cel mai sensibil semn al activării, atunci când este expus la trombocite folosind ADP, sunt modificările morfologice. Hiperpolarizarea mitocondrială este un eveniment cheie în inițierea modificărilor morfologice. Concentrația de calciu intraplachetară crește, stimulând interacțiunea dintre complexul de microtubuli / filament de actină. Modificările continue ale formei de la trombocitul neactivat la cel activat complet se observă cel mai bine la microscopia electronică de scanare. Trei pași de-a lungul acestei căi sunt denumiți dendritici timpurii , răspândire timpurie și răspândire . Suprafața trombocitelor neactivate arată foarte asemănătoare cu suprafața creierului, cu un aspect ridat din numeroase pliuri superficiale pentru a crește suprafața; dendritic timpuriu , o caracatiță cu brațe și picioare multiple; răspândirea timpurie , un ou de gătit nefiert într-o tigaie, „gălbenușul” fiind corpul central; și răspândirea , un ou prăjit gătit cu un corp central mai dens.

Aceste modificări sunt provocate de interacțiunea complexului de microtubuli / actină cu membrana celulară trombocitară și sistemul canalicular deschis (OCS), care este o extensie și invaginare a membranei respective. Acest complex rulează chiar sub aceste membrane și este motorul chimic care scoate literalmente OCS-ul invaginat din interiorul trombocitelor, ca și cum întoarceți buzunarele pantalonilor în afară, creând dendritele. Acest proces este similar cu mecanismul de contracție al unei celule musculare . Întregul OCS devine astfel indistinct de membrana plachetară inițială pe măsură ce formează „oul prăjit”. Această creștere dramatică a suprafeței are loc nici cu întinderea, nici cu adăugarea fosfolipidelor la membrana plachetară.

Interacțiuni factor plachetă-coagulare: facilitarea coagulării

Activarea trombocitelor face ca suprafața membranei să devină încărcată negativ. Una dintre căile de semnalizare activează scramblaza , care mută fosfolipidele încărcate negativ de la suprafața membranei plăcii interioare la exterioare. Aceste fosfolipide leagă apoi complexele tenază și protrombinază , două dintre locurile de interacțiune dintre trombocite și cascada de coagulare. Ionii de calciu sunt esențiali pentru legarea acestor factori de coagulare.

Pe lângă interacțiunea cu vWF și fibrină, trombocitele interacționează cu trombina, factorii X, Va, VIIa, XI, IX și protrombină pentru a completa formarea prin cascada de coagulare. Șase studii au sugerat că trombocitele exprimă factorul tisular : studiul definitiv arată că nu. Trombocitele de la șobolani s-au arătat în mod concludent că exprimă proteina factorului tisular și, de asemenea, s-a dovedit că trombocitele de șobolan poartă atât factorul tisular pre-ARNm, cât și ARNm matur.

Agregare

Trombocitele se aglomerează într-un frotiu de sânge

Agregarea începe la câteva minute după activare și apare ca urmare a pornirii receptorului GPIIb / IIIa , permițând acestor receptori să se lege cu vWF sau fibrinogen . Există aproximativ 60.000 dintre acești receptori pe trombocite. Atunci când unul sau mai mulți dintre cel puțin nouă receptori de suprafață trombocitare diferiți sunt aprinși în timpul activării, căile de semnalizare intraplachete determină schimbarea formei receptorilor GpIIb / IIIa existenți - ondulați în drepți - și astfel devin capabili de legare.

Deoarece fibrinogenul este o proteină asemănătoare cu tija cu noduli la fiecare capăt capabilă să lege GPIIb / IIIa, trombocitele activate cu GPIIb / IIIa expuse pot lega fibrinogenul de agregat. GPIIb / IIIa poate, de asemenea, să ancoreze în continuare trombocitele de vWF subendotelial pentru stabilizare structurală suplimentară.

În mod clasic, sa crezut că acesta a fost singurul mecanism implicat în agregare, dar au fost identificate trei noi mecanisme care pot iniția agregarea, în funcție de viteza fluxului sanguin (adică intervalul de forfecare).

Repararea rănilor

Cheagul de sânge este doar o soluție temporară pentru a opri sângerarea; este necesară repararea țesuturilor. Micile întreruperi ale endoteliului sunt tratate de mecanisme fiziologice; mari întreruperi ale chirurgului traumatism. Fibrina este dizolvată încet de enzima fibrinolitică, plasmină, iar trombocitele sunt eliminate prin fagocitoză .

Funcție imunitară

Trombocitele au rol central în imunitatea înnăscută, inițierea și participarea la multiple procese inflamatorii, legând direct agenții patogeni și chiar distrugându-i. Acest lucru susține datele clinice care arată că mulți cu infecții bacteriene sau virale grave prezintă trombocitopenie, reducând astfel contribuția lor la inflamație. De asemenea, agregatele plachete-leucocite (PLA) găsite în circulație sunt tipice în sepsis sau în boala inflamatorie a intestinului , arătând legătura dintre trombocite și celulele imune sensu stricto .

Imunotromboza

Deoarece hemostaza este o funcție de bază a trombocitelor la mamifere, are și ea utilizări în posibile confinări ale infecțiilor. În caz de rănire, trombocitele, împreună cu cascada de coagulare, formează prima linie de apărare prin formarea unui cheag de sânge. Astfel, hemostaza și apărarea gazdei au fost împletite în evoluție. De exemplu, în potcoava Atlanticului ( fosila vie estimată a avea peste 400 de milioane de ani), singurul tip de celule sanguine, amebocitul , facilitează atât funcția hemostatică, cât și încapsularea și fagocitoza agenților patogeni prin intermediul exocitozei granulelor intracelulare care conțin molecule de apărare bactericide . Coagularea sângelui sprijină funcția imună prin prinderea bacteriilor patogene din interior.

Deși tromboza, coagularea sângelui în vasele de sânge intacte, este de obicei privită ca un răspuns imun patologic, ducând la obturarea lumenului vasului de sânge și la deteriorarea ulterioară a țesuturilor hipoxice, în unele cazuri, tromboza direcționată, numită imunotromboză, poate controla local răspândirea infecţie. Tromboza este direcționată în concordanță cu trombocite, neutrofile și monocite . Procesul este inițiat fie de celulele imune sensu stricto prin activarea receptorilor lor de recunoaștere a modelelor (PRR), fie prin legarea trombocitelor-bacteriene. Trombocitele se pot lega de bacterii fie direct prin PRR trombocitare și proteine ​​de suprafață bacteriene, fie prin intermediul proteinelor plasmatice care se leagă atât de trombocite, cât și de bacterii. Monocitele răspund la modelele moleculare asociate cu agentul patogen bacterian (PAMP) sau la modelele moleculare asociate cu deteriorarea (DAMP) prin activarea căii extrinseci a coagulării. Neutrofilele facilitează coagularea sângelui prin NETosis . La rândul său, trombocitele facilitează NEToza neutrofilelor. NET-urile leagă factorul tisular, legând centrele de coagulare de locul infecției. De asemenea, activează calea de coagulare intrinsecă prin furnizarea suprafeței sale încărcate negativ factorului XII. Alte secreții de neutrofile, cum ar fi enzimele proteolitice, care scindează inhibitorii coagulării, susțin, de asemenea, procesul.

În caz de dezechilibru pe tot parcursul reglării imunotrombozei, acest proces poate deveni rapid aberant. Defectele de reglementare ale imunotrombozei sunt suspectate a fi factorul major în provocarea trombozei patologice în multe forme, cum ar fi coagularea intravasculară diseminată (DIC) sau tromboza venoasă profundă . DIC în sepsis este un prim exemplu atât al procesului de coagulare neregulat, cât și al răspunsului inflamator sistemic nejustificat, rezultând o multitudine de microtrombi cu o compoziție similară cu cea din imunotromboza fiziologică - fibrină, trombocite, neutrofile și NET.

Inflamaţie

Trombocitele sunt dislocate rapid în locurile de rănire sau infecție și pot modula procesele inflamatorii prin interacțiunea cu leucocitele și prin secretarea de citokine , chimiocine și alți mediatori inflamatori. Trombocitele secretă, de asemenea, factorul de creștere derivat din trombocite (PDGF).

Trombocitele modulează neutrofilele formând agregate trombocite-leucocite (PLA). Aceste formațiuni induc producția reglată în sus a integrinei αmβ2 ( Mac-1 ) în neutrofile. Interacțiunea cu PLA induce, de asemenea, degradarea și creșterea fagocitozei la neutrofile. Trombocitele sunt, de asemenea, cea mai mare sursă de CD40L solubil care induce producția de specii reactive de oxigen (ROS) și reglează în sus expresia moleculelor de adeziune, cum ar fi E-selectina, ICAM-1 și VCAM-1, în neutrofile, activează macrofagele și activează răspunsul citotoxic în Limfocitele T și B.

Recent, dogma conform căreia trombocitele mamiferelor lipsite de nucleu sunt incapabile de locomoție autonomă a fost spartă. De fapt, trombocitele sunt colectoare active, scalează pereții vaselor de sânge și reorganizează trombul. Sunt capabili să recunoască și să adere la multe suprafețe, inclusiv bacterii. Sunt chiar capabili să le învelească pe deplin în sistemul lor canalicular deschis (OCP), ceea ce duce la denumirea propusă a procesului fiind „covercitoză”, mai degrabă decât fagocitoză, deoarece OCS este doar o invaginare a membranei plasmatice externe. Aceste pachete de trombocite-bacterii sunt apoi utilizate ca platformă de interacțiune pentru neutrofile care distrug bacteriile folosind NETosis și fagocitoza.

Trombocitele participă, de asemenea, la boli inflamatorii cronice, cum ar fi sinovita sau artrita reumatoidă. Trombocitele sunt activate de glicoproteina IV a receptorului de colagen (GPVI). Microvezicele trombocitare proinflamatorii declanșează o secreție constantă de citokine din sinoviocitele vecine asemănătoare fibroblastelor , cel mai proeminent Il-6 și Il-8 . Afectarea inflamatorie a matricei extracelulare înconjurătoare dezvăluie continuu mai mult colagen, menținând producția de microvesicule.

Imunitate adaptiva

Trombocitele activate pot participa la imunitatea adaptivă, interacționând cu anticorpii . Ei sunt capabili să lege în mod specific IgG prin FcyRIIA , receptor pentru fragmentul constant (Fc) de IgG. Când sunt activate și legate de bacterii opsonizate IgG , trombocitele eliberează ulterior specii reactive de oxigen (ROS), peptide antimicrobiene, defensine, kinocidine și proteaze, ucigând bacteriile direct. Trombocitele secretă, de asemenea, mediatori proinflamatori și procoagulanți, cum ar fi polifosfații anorganici sau factorul plachetar 4 (PF4), conectând răspunsurile imune înnăscute și adaptative.

Semne și simptome ale tulburărilor

Sângerările spontane și excesive pot apărea din cauza tulburărilor plachetare. Această sângerare poate fi cauzată de un număr deficitar de trombocite, trombocite disfuncționale sau un număr foarte mare de trombocite: peste 1,0 milioane / microlitru. (Numerele excesive creează o deficiență relativă a factorului von Willebrand datorită sechestrării.)

Se poate obține un indiciu dacă sângerarea se datorează unei tulburări de trombocite sau unei tulburări a factorului de coagulare în funcție de caracteristicile și localizarea sângerării. Toate următoarele sugerează sângerări plachete, nu sângerări de coagulare: sângerarea de la o tăietură a pielii, cum ar fi o crestătură de ras, este promptă și excesivă, dar poate fi controlată prin presiune; sângerări spontane în piele care provoacă o pată violet numită după mărimea sa: petechii , purpură , echimoze ; sângerarea în membranele mucoase cauzând sângerarea gingiilor, sângerarea nasului și sângerarea gastro-intestinală; menoragie; și sângerări intraretinale și intracraniene.

Un număr excesiv de trombocite și / sau trombocite normale care răspund la pereții anormali ai vaselor pot duce la tromboză venoasă și tromboză arterială . Simptomele depind de locul trombozei.

Teste de funcționare

De exemplu, pe densitometria optică, se observă o primă și a doua undă de agregare a trombocitelor, în acest caz pentru o agregare inițiată de ADP . Datele sugerează că ADP activează calea PI3K / Akt în timpul primului val de agregare, ducând la generarea de trombină și activarea PAR-1 , care evocă al doilea val de agregare.

Timp de sângerare

Timpul de sângerare a fost dezvoltat pentru prima dată ca test al funcției trombocitelor de către Duke în 1910. Testul lui Duke a măsurat timpul necesar sângerării pentru a se opri de la o plagă standardizată în lobul urechii care a fost ștearsă la fiecare 30 de secunde. Timpul normal pentru oprirea sângerării a fost mai mic de 3 minute. Acum sunt folosite tehnici mai moderne. Un timp normal de sângerare reflectă un număr și funcții suficiente de trombocite, plus microvasculatura normală .

Agregometrie cu electrozi multipli

În agregometria cu electrozi multipli , sângele integral anticoagulat este amestecat cu soluție salină și un agonist de trombocite într-o cuvă de unică folosință cu două perechi de electrozi. Creșterea impedanței dintre electrozi pe măsură ce trombocitele se agregează pe ele, este măsurată și vizualizată ca o curbă.

Funcția de agregare a trombocitelor de către tulburări și agoniști   editează
ADP Epinefrina Colagen Ristocetin
Defect al receptorului P2Y (inclusiv Clopidogrel ) Scăzut Normal Normal Normal
Defect al receptorului adrenergic Normal Scăzut Normal Normal
Defect al receptorului de colagen Normal Normal Scăzut sau absent Normal
Normal Normal Normal Scăzut sau absent
Scăzut Scăzut Scăzut Normal sau scăzut
Deficiența bazinului de stocare Al doilea val absent Parțial
Aspirină sau tulburare asemănătoare aspirinei Al doilea val absent Absent Normal

Agregometrie de transmisie a luminii

În agregometria cu transmitere a luminii (LTA), plasma bogată în trombocite este plasată între o sursă de lumină și o fotocelulă. Plasma neagregată permite trecerea relativ redusă a luminii. După adăugarea unui agonist, trombocitele se agregă, rezultând o transmisie mai mare a luminii, care este detectată de fotocelulă.

PFA-100

PFA-100 (Trombocite Function Test - 100) este un sistem de analiză a funcției plachetare în care citrata sângele integral este aspirat printr - un cartuș de unică folosință care conține o deschidere într - o membrană acoperite fie cu colagen și epinefrină sau colagen si ADP. Acești agoniști induc aderența, activarea și agregarea plachetelor, ducând la ocluzia rapidă a diafragmei și la încetarea fluxului sanguin denumit timpul de închidere (CT). O CT crescută cu EPI și colagen poate indica defecte intrinseci, cum ar fi boala von Willebrand , uremie sau inhibitori de trombocite circulante. Testul de urmărire care implică colagen și ADP este utilizat pentru a indica dacă CT anormal cu colagen și EPI a fost cauzat de efectele acidului acetilsulfosalicilic (aspirină) sau medicamente care conțin inhibitori.

Tulburări

Luat din:

Cele trei mari categorii de tulburări plachetare nu sunt „suficiente”; „disfuncțional”; și „prea mulți”.

Trombocitopenie

Funcția alterată a trombocitelor

Trombocitoză și trombocitemie

Droguri care afectează

Medicamente antiinflamatoare

Unele medicamente utilizate pentru tratarea inflamației au efectul secundar nedorit al suprimării funcției normale a trombocitelor. Acestea sunt medicamente antiinflamatoare nesteroidiene (AINS). Aspirina perturbă ireversibil funcția trombocitelor prin inhibarea ciclooxigenazei -1 (COX1) și, prin urmare, a hemostazei normale. Trombocitele rezultate sunt incapabile să producă noi ciclooxigenază, deoarece nu au ADN. Funcția normală a trombocitelor nu va reveni până când încetarea utilizării aspirinei și suficiente dintre trombocitele afectate au fost înlocuite cu altele noi, care pot dura peste o săptămână. Ibuprofenul , un alt AINS , nu are un efect atât de îndelungat, funcția plachetară revenind de obicei în 24 de ore, iar administrarea de ibuprofen înainte de aspirină previne efectele ireversibile ale aspirinei.

Medicamente care suprimă funcția trombocitelor

Aceste medicamente sunt utilizate pentru a preveni formarea trombului.

Agenți orali

Medicamente care stimulează producția de trombocite

Agenți intravenoși

Terapie cu trombocite

Transfuzie

Indicații

Transfuzia de trombocite este folosită cel mai frecvent pentru corectarea numărului de trombocite neobișnuit de scăzut, fie pentru a preveni sângerarea spontană (de obicei la numărul sub 10 × 10 9 / L), fie în așteptarea procedurilor medicale care vor implica în mod necesar unele sângerări. De exemplu, la pacienții supuși unei intervenții chirurgicale , un nivel sub 50 × 10 9 / L este asociat cu sângerări chirurgicale anormale, iar procedurile anestezice regionale , cum ar fi epiduralele, sunt evitate pentru niveluri sub 80 × 10 9 / L. Trombocitele pot fi, de asemenea, transfuzate atunci când numărul de trombocite este normal, dar trombocitele sunt disfuncționale, cum ar fi atunci când un individ ia aspirină sau clopidogrel . În cele din urmă, trombocitele pot fi transfuzate ca parte a unui protocol masiv de transfuzie , în care cele trei componente sanguine majore (globule roșii, plasmă și trombocite) sunt transfuzate pentru a aborda hemoragia severă. Transfuzia de trombocite este contraindicată în purpura trombocitopenică trombotică (TTP), deoarece alimentează coagulopatia .

Colectie

Concentrat de trombocite.

Trombocitele sunt fie izolate din unități colectate de sânge integral și reunite pentru a face o doză terapeutică, fie colectate prin afereză plachetară : sângele este preluat de la donator, trecut printr-un dispozitiv care îndepărtează trombocitele, iar restul este returnat donatorului într-un buclă închisă. Standardul industrial este ca trombocitele să fie testate pentru bacterii înainte de transfuzie pentru a evita reacțiile septice, care pot fi fatale. Recent, Standardele industriale AABB pentru băncile de sânge și serviciile de transfuzie (5.1.5.1) au permis utilizarea tehnologiei de reducere a agenților patogeni ca alternativă la screeningul bacterian din trombocite.

Trombocitele din sânge întreg, uneori numite trombocite „aleatorii”, sunt separate prin una din cele două metode. În SUA, o unitate de sânge integral este plasată într-o centrifugă mare în ceea ce se numește „rotire moale”. La aceste setări, trombocitele rămân suspendate în plasmă. Plasma bogată în trombocite (PRP) este îndepărtat din celulele roșii, apoi centrifugate la o mai rapidă setare pentru a recolta trombocitele din plasmă. În alte regiuni ale lumii, unitatea de sânge integral este centrifugată folosind setări care determină ca trombocitele să fie suspendate în stratul destratul tampon ”, care include trombocitele și globulele albe din sânge. „Manta tamponată” este izolată într-o pungă sterilă, suspendată într-o cantitate mică de globule roșii și plasmă, apoi centrifugată din nou pentru a separa trombocitele și plasma de celulele roșii și albe din sânge. Indiferent de metoda inițială de preparare, donațiile multiple pot fi combinate într-un singur recipient folosind un dispozitiv de conectare steril pentru a produce un singur produs cu doza terapeutică dorită.

Trombocitele de afereză sunt colectate folosind un dispozitiv mecanic care extrage sângele de la donator și centrifugează sângele colectat pentru a separa trombocitele și alte componente care trebuie colectate. Sângele rămas este returnat donatorului. Avantajul acestei metode este că o singură donație oferă cel puțin o doză terapeutică, spre deosebire de donațiile multiple pentru trombocite de sânge integral. Aceasta înseamnă că un destinatar nu este expus la atât de mulți donatori diferiți și are un risc mai mic de boală transmisă prin transfuzie și alte complicații. Uneori, o persoană, cum ar fi un bolnav de cancer, care necesită transfuzii de rutină de trombocite, va primi donații repetate de la un anumit donator pentru a minimiza și mai mult riscul. Reducerea agenților patogeni a trombocitelor utilizând, de exemplu, tratamente cu riboflavină și lumină UV poate fi efectuată, de asemenea, pentru a reduce încărcătura infecțioasă a agenților patogeni conținuți în produsele sanguine donate, reducând astfel riscul de transmitere a bolilor transmise prin transfuzie. Un alt proces de tratament fotochimic care utilizează amotosalen și lumină UVA a fost dezvoltat pentru inactivarea virușilor, bacteriilor, paraziților și leucocitelor care pot contamina componentele sanguine destinate transfuziei. În plus, trombocitele de afereză tind să conțină mai puține celule roșii din sânge, deoarece metoda de colectare este mai eficientă decât centrifugarea cu „rotire moale” la izolarea componentei sanguine dorite.

Depozitare

Trombocitele colectate prin ambele metode au o perioadă de valabilitate foarte scurtă, de obicei cinci zile. Acest lucru are ca rezultat probleme frecvente cu lipsă, deoarece testarea donațiilor necesită adesea până la o zi întreagă. Deoarece nu există soluții eficiente de conservare pentru trombocite, acestea își pierd puterea rapid și sunt cele mai bune atunci când sunt proaspete.

Trombocitele sunt depozitate sub agitare constantă la 20-24 ° C (68-75,2 ° F). Unitățile nu pot fi refrigerate, deoarece acest lucru face ca trombocitele să-și schimbe forma și să-și piardă funcția. Depozitarea la temperatura camerei oferă un mediu în care orice bacterie care este introdusă în componenta sanguină în timpul procesului de colectare poate prolifera și, ulterior, poate provoca bacteremie la pacient. În Statele Unite există reglementări care impun testarea produselor pentru prezența contaminării bacteriene înainte de transfuzie.

Trombocite colectate prin utilizarea aferezei la un centru de donații al Crucii Roșii Americane .

Livrarea către destinatari

Trombocitele nu trebuie să aparțină aceleiași grupe de sânge ABO ca destinatar sau să fie potrivite pentru a asigura compatibilitatea imună între donator și destinatar, cu excepția cazului în care conțin o cantitate semnificativă de celule roșii din sânge (globule roșii). Prezența eritrocitelor conferă produsului o culoare roșiatică-portocalie și este de obicei asociată cu trombocite din sângele integral. Uneori se depune un efort pentru a elibera trombocite specifice tipului, dar acest lucru nu este esențial, așa cum se întâmplă în cazul eritrocitelor.

Înainte de a elibera trombocite destinatarului, acestea pot fi iradiate pentru a preveni grefa asociată cu transfuzia versus boala gazdă sau pot fi spălate pentru a îndepărta plasma, dacă este indicat.

Modificarea numărului de trombocite al beneficiarului după transfuzie este denumită „creștere” și se calculează prin scăderea numărului de trombocite pre-transfuzional din numărul de trombocite post-transfuzional. Mulți factori afectează creșterea, inclusiv dimensiunea corpului destinatarului, numărul de trombocite transfuzate și caracteristicile clinice care pot provoca distrugerea prematură a trombocitelor transfuzate. Când destinatarii nu reușesc să demonstreze o creștere adecvată post-transfuzie, aceasta se numește refractaritate a transfuziei de trombocite .

Trombocitele, fie derivate din afereză, fie donatoare aleatorii, pot fi procesate printr-un proces de reducere a volumului . În acest proces, trombocitele sunt filate într-o centrifugă și excesul de plasmă este îndepărtat, lăsând 10 până la 100 ml de concentrat de trombocite. Astfel de trombocite cu volum redus sunt transfuzate în mod normal numai la pacienții nou-născuți și copii când un volum mare de plasmă ar putea suprasolicita sistemul circulator mic al copilului. Volumul mai mic de plasmă reduce și șansele unei reacții adverse de transfuzie la proteinele plasmatice. Trombocitele cu volum redus au o durată de valabilitate de numai patru ore.

Terapia plăgilor

Trombocitele eliberează factorul de creștere derivat din trombocite (PDGF), un agent chemotactic puternic ; și TGF beta , care stimulează depunerea matricei extracelulare ; factor de creștere a fibroblastelor , insulina-like growth factor 1 , derivat din trombocite factorul de creștere epidermic , și factorul de creștere endotelial vascular . Aplicarea locală a acestor factori în concentrații crescute prin plasmă bogată în trombocite (PRP) este utilizată ca adjuvant în vindecarea rănilor.

Alte animale

În loc să aibă trombocite, vertebratele non-mamifere au trombocite nucleate, care seamănă cu limfocitele B în morfologie. Ele se agregă ca răspuns la trombină, dar nu la ADP, serotonină și nici adrenalină, așa cum fac trombocitele.

Istorie

  • George Gulliver a desenat în 1841 imagini cu trombocite folosind microscopul cu două lentile (compus) inventat în 1830 de Joseph Jackson Lister . Acest microscop a îmbunătățit rezoluția suficient pentru a face posibilă vizualizarea trombocitelor pentru prima dată.
  • William Addison în 1842 a desenat imagini ale unui cheag de trombocite-fibrină.
  • Lionel Beale în 1864 a fost primul care a publicat un desen care prezintă trombocite.
  • Max Schultze în 1865 a descris ceea ce el a numit „sferule”, despre care a remarcat că sunt mult mai mici decât celulele roșii din sânge, ocazional aglomerate și uneori au fost găsite în colecții de material de fibrină.
  • Giulio Bizzozero în 1882 a studiat sângele amfibienilor microscopic in vivo . El a numit sferulele lui Schultze (It.) Piastrină : plăci mici. Un articol din Scientific American sugerează că Bizzozero a propus numele Blutplattchen.
  • William Osler a observat trombocite și, în prelegeri publicate în 1886, le-a numit un al treilea corpuscul și o placă de sânge ; și le-a descris ca „un disc protoplasmatic incolor”.
  • James Wright a examinat frotiurile de sânge folosind pata numită pentru el și a folosit termenul plăci în publicația sa din 1906, dar a schimbat în trombocite în publicația sa din 1910, care a devenit termenul universal acceptat.

Termenul de trombocit (celulă de cheag) a intrat în uz la începutul anilor 1900 și este uneori folosit ca sinonim pentru trombocite; dar nu în general în literatura științifică, cu excepția cuvântului rădăcină pentru alți termeni legați de trombocite (de exemplu, trombocitopenie care înseamnă trombocite scăzute). Termenul de trombocite este potrivit pentru celulele mononucleare care se găsesc în sângele vertebratelor non-mamifere: sunt echivalentul funcțional al trombocitelor, dar circulă mai degrabă ca celule intacte decât fragmente citoplasmatice ale megacariocitelor măduvei osoase.

În unele contexte, cuvântul tromb este utilizat interschimbabil cu cuvântul cheag , indiferent de compoziția sa (alb, roșu sau mixt). În alte contexte se folosește pentru a contrasta un cheag normal de un cheag anormal: trombul apare din hemostaza fiziologică, tromboza apare dintr-o cantitate patologică și excesivă de cheag. Într-un al treilea context este folosit pentru a contrasta rezultatul din proces: trombul este rezultatul, tromboza este procesul.

Referințe

linkuri externe

  • Video care rezumă dinamica trombocitelor ( Speaker Icon.svgpagina va reda sunetul la încărcare)