Liza - Lysis
Lysis ( / l aɪ s ɪ s / LY -sis ; greacă λύσις lizei , "o pierdere" din λύειν lýein "la unbind") este de rupere jos a membranei unei celule de , adesea prin virale , enzimic sau osmotic (adică, "litice" / l ɪ t ɪ k / LIT -ək ) mecanisme care compromit integritatea. Un lichid care conține conținutul celulelor lizate se numește lizat. În laboratoarele de biologie moleculară , biochimie și biologie celulară , culturile celulare pot fi supuse lizei în procesul de purificare a componentelor lor, cum ar fi în purificarea proteinelor , extracția ADN , extracția ARN sau în organele de purificare .
Multe specii de bacterii sunt supuse lizei de către enzima lizozimă , care se găsește în saliva animalelor , în albușul de ou și în alte secreții . Enzimele litice fagice (lizine) produse în timpul infecției cu bacteriofagi sunt responsabile pentru capacitatea acestor virusuri de a liza celulele bacteriene. Penicilina și antibioticele β-lactamice asociate cauzează moartea bacteriilor prin liza mediată de enzime care apare după ce medicamentul determină bacteriei să formeze un perete celular defect . Dacă peretele celular este complet pierdut și penicilina a fost utilizată pe bacteriile gram-pozitive , atunci bacteria este denumită protoplast , dar dacă penicilina a fost utilizată pe bacteriile gram-negative , atunci se numește sferoplast .
Citoliza
Citoliza apare atunci când o celulă izbucnește din cauza unui dezechilibru osmotic care a determinat deplasarea excesului de apă în celulă.
Citoliza poate fi prevenită prin mai multe mecanisme diferite, inclusiv vacuolul contractil care există în unele paramecii , care pompează rapid apa din celulă. Citoliza nu apare în condiții normale în celulele vegetale, deoarece celulele vegetale au un perete celular puternic care conține presiunea osmotică sau presiunea turgor , care altfel ar provoca citoliza.
Oncoliza
Oncoliza este distrugerea celulelor neoplazice sau a unei tumori .
Termenul este, de asemenea, utilizat pentru a se referi la reducerea oricărei umflături .
Plasmoliza
Plasmoliza este contracția celulelor din plante datorită pierderii de apă prin osmoză . Într-un mediu hiperton , membrana celulară se desprinde de peretele celular și vacuolul se prăbușește. Aceste celule se vor ofili și vor muri, cu excepția cazului în care fluxul de apă cauzat de osmoză poate opri contracția membranei celulare .
Răspuns imun
Hemoglobina eritrocitelor eliberează radicali liberi ca răspuns la agenții patogeni atunci când sunt lizați de aceștia. Acest lucru poate deteriora agenții patogeni.
Aplicații
Liza celulară este utilizată în laboratoare pentru a sparge celulele deschise și a purifica sau studia în continuare conținutul acestora. Liza din laborator poate fi afectată de enzime sau detergenți sau alți agenți caotropici . Întreruperea mecanică a membranelor celulare, cum ar fi prin înghețarea și dezghețarea repetată, sonicarea , presiunea sau filtrarea pot fi, de asemenea, denumite liză. Multe experimente de laborator sunt sensibile la alegerea mecanismului de liză; de multe ori este de dorit să se evite forțele mecanice de forfecare care să denatureze sau să degradeze macromoleculele sensibile, cum ar fi proteinele și ADN-ul , iar diferite tipuri de detergenți pot produce rezultate diferite. Soluția neprelucrată imediat după liză, dar înainte de orice alte etape de extracție este adesea denumită lizat brut .
De exemplu, liza este utilizată în Western Blotting și Southern pentru a analiza compoziția proteinelor , lipidelor și acizilor nucleici specifici individual sau ca complexe . În funcție de detergentul utilizat, toate sau unele membrane sunt lizate. De exemplu, dacă numai membrana celulară este lizată, atunci centrifugarea în gradient poate fi utilizată pentru a colecta anumite organite . Liza este, de asemenea, utilizată pentru purificarea proteinelor , extracția ADN și extracția ARN .
Metode
Liza chimică
Această metodă utilizează întreruperi chimice. Este cea mai populară și simplă abordare. Liza chimică se deteriorează / solubilizează chimic proteinele și lipidele prezente în membrana celulelor vizate.
Liza acustică
Această metodă folosește unde ultrasonice pentru a genera zone de presiune ridicată și joasă, care provoacă cavitație și, la rândul său, liză celulară. Deși această metodă iese de obicei curată, nu reușește să fie rentabilă și consecventă.
Liza mecanică
Această metodă utilizează penetrarea fizică pentru a străpunge sau tăia o membrană celulară.